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一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑.pdf

摘要
申請專利號:

CN201210589723.0

申請日:

2012.12.31

公開號:

CN103005220B

公開日:

2015.01.07

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A23K 1/18申請日:20121231|||公開
IPC分類號: A23K1/18; A23K1/16 主分類號: A23K1/18
申請人: 南京同凱兆業生物技術有限責任公司
發明人: 陳曉春; 黃小權; 蔡家棟; 張磊; 盛兵; 李淑亞; 湯亦文
地址: 211816 江蘇省南京市浦口區浦珠南路30號
優先權:
專利代理機構: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 代理人: 肖明芳
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201210589723.0

授權公告號:

103005220B||||||

法律狀態公告日:

2015.01.07|||2013.05.01|||2013.04.03

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明公開了一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑,所述的核苷酸包括腺苷酸5’-AMP、胞苷酸5’-CMP、鳥苷酸5’-GMP和尿苷酸5’-UMP,各成份之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.9~1.5:0.7~1.2:1.1~2.0:0.8~1.5。本發明飼料添加劑能顯著增加羅非魚腸道的長度,提高羅非魚的生長效率、對飼料的利用率和對環境的承受能力,同時核苷酸的添加大大增強了羅非魚的非特異性免疫能力,這都對目前集約化羅非魚的集約化養殖產業有深刻的意義。

權利要求書

權利要求書一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑,其特征在于,所述的核苷酸包括腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP,各成份之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.9~1.5:0.7~1.2:1.1~2.0:0.8~1.5。
根據權利要求1所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑,其特征在于,所述的核苷酸為核苷酸的酸或鹽的形式,所述的核苷酸的鹽的形式為核苷酸的鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽或鐵鹽。
權利要求1所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑的制備方法,其特征在于,將配方量的腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP純品混合均勻,制得。
權利要求1所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑的制備方法,其特征在于,以核糖核酸為原料,酶法水解得到混合核苷酸液體經直接噴霧干燥得到噴干的混合核苷酸,再根據配方量添加相應的腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP純品,使得各成份之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.8~1.3:0.3~0.8:1.1~1.5:0.7~1.4。
根據權利要求4所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑的制備方法,其特征在于,所述的噴干的混合核苷酸包含如下重量百分比的組分:混合核苷酸42~60%、粗蛋白14~18%、粗脂肪2~6%、灰分15~25%、水分5~9%。
根據權利要求4所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑的制備方法,其特征在于,所述的核糖核酸來源于面包酵母、產朊假絲酵母、熱帶假絲酵母、球擬酵母或釀酒酵母中的一種。
權利要求1所述的羅非魚用核苷酸飼料添加劑在羅非魚飼料中的應用。
根據權利要求7所述的應用,其特征在于,羅非魚用核苷酸飼料添加劑能顯著增加羅非魚腸道的長度,提高羅非魚的生長效率、對飼料的利用率和對環境的承受能力,同時增強了羅非魚的非特異性免疫能力。
根據權利要求7所述的應用,其特征在于,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的添加量占飼料重量的0.2%~1.6%,其中,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的添加量以總核苷酸量計。
根據權利要求7所述的應用,其特征在于,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的使用形態為固體制劑。

說明書

說明書一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑
技術領域
本發明涉及一種魚類飼料添加劑,具體涉及一種羅非魚飼料添加劑,屬于魚類養殖領域。
背景技術
原產在非洲的羅非魚它對外界環境條件要求不高,具有很強的適應能力和繁殖能力,養殖周期短,營養豐富,肉味鮮美并含有豐富的蛋白質及鈣、磷、鐵、維生素等。所以現在羅非魚已成為國際市場上最活躍的水產品貿易對象,具有廣闊的市場前景。
但是目前在羅非魚的高密度養殖過程中,普遍存在飼料系數偏高,飼料轉化率較低,化學合成藥物濫用、因較高的飼料系數所造成的水環境惡化和隨之而來的魚體免疫力下降等問題。而且隨著近年來全球能源和糧食資源價格的持續增加,使得飼料生產企業與養殖生產者的成本不斷增加、收益下降,這就更在一定程度上制約了羅非魚養殖業的發展壯大。
核苷酸對于動物的生理和營養具有多種生理功效。雖然大多數的生物體都能自身合成核苷酸,但由于核苷酸的合成在代謝上是一個耗費代價的過程,尤其是當機體處于快速生長發育、應激等條件下,內源核苷酸相對合成不足,不能滿足代謝旺盛的器官和組織的需要,這時就需要外源核苷酸供給。飼料中添加核苷酸可促進動物腸道的生長,增加腸道吸收面積,改善腸道功能,促進消化,使動物能吸收更多的營養物質,并且飼料中添加核苷酸能刺激動物的特異性和非特異性反應,通過增強動物的免疫系統明顯地提高動物的抗病能力和抗應激能力。核苷酸作為一種新型的飼料添加劑,目前在水產養殖中的研究還較少。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種可以顯著增加羅非魚腸道長度,改變代謝酶的活性,增強魚體的非特異性免疫能力,提高飼料利用效率,從而最終提高羅非魚生長效率的核苷酸飼料添加劑。
為解決上述技術問題,本發明采用如下技術方案:
一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑,所述的核苷酸包括腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP,各成份之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.9~1.5:0.7~1.2:1.1~2.0:0.8~1.5。
其中,所述的核苷酸為核苷酸的酸或鹽的形式,所述的核苷酸的鹽的形式為核苷酸的鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽或鐵鹽。
上述羅非魚用核苷酸飼料添加劑的第一種制備方法,將配方量的腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP純品(各組分純度優選在99%以上)混合均勻,制得。
上述羅非魚用核苷酸飼料添加劑的第二種制備方法,以核糖核酸為原料,酶法水解得到混合核苷酸液體經直接噴霧干燥得到噴干的混合核苷酸,再根據配方量添加相應的腺苷酸5’?AMP、胞苷酸5’?CMP、鳥苷酸5’?GMP和尿苷酸5’?UMP純品(各組分純度優選在99%以上),使得各成份之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.8~1.3:0.3~0.8:1.1~1.5:0.7~1.4。
其中,所述的噴干的混合核苷酸包含如下重量百分比的組分:混合核苷酸42~60%、粗蛋白14~18%、粗脂肪2~6%、灰分15~25%、水分5~9%。一般核糖核酸通過酶解噴干得到的混合核苷酸很容易滿足該指標。
其中,所述的核糖核酸來源于面包酵母、產朊假絲酵母、熱帶假絲酵母、球擬酵母或釀酒酵母中的一種。
上述羅非魚用核苷酸飼料添加劑在羅非魚飼料中的應用。本發明飼料添加劑能顯著增加羅非魚腸道的長度,提高羅非魚的生長效率、對飼料的利用率和對環境的承受能力,同時核苷酸的添加大大增強了羅非魚的非特異性免疫能力,這都對目前集約化羅非魚的集約化養殖產業有深刻的意義。
其中,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的添加量占飼料重量的0.2%~1.6%,其中,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的添加量以總核苷酸量計。
其中,羅非魚用核苷酸飼料添加劑的使用形態為固體制劑,優選為粉末形式、或顆粒形式、或微顆粒形式、或微粒形式。
有益效果:與現有技術相比,本發明的羅非魚核苷酸飼料添加劑技術具有如下優勢:
(1)本發明的核苷酸飼料添加劑來源于自然界中分布廣泛的酵母細胞,生產工藝簡單無污染,得到的核苷酸產品是一種綠色、環境友好型飼料添加劑。
(2)本發明的核苷酸飼料添加劑可明顯增加魚體的腸道長度,提高飼料的利用效率和羅非魚的生長效率,降低養殖成本。
(3)本發明的核苷酸飼料添加劑可以顯著提高魚體對環境的適應能力,明顯提高了魚體的肥滿度,并且提高了肌肉中干物質和蛋白質的含量,降低了魚體肌肉中的灰分,使羅非魚的營養價值得以大大提升。
(4)超氧化物歧化酶和溶菌酶活性是評價魚類免疫力的常用指標。添加適量本發明的核苷酸飼料添加劑后,超氧化物歧化酶和溶菌酶活力明顯增加,這表明羅非魚的非特異性免疫能力得以大大改善。
具體實施方式
根據下述實施例,可以更好地理解本發明。然而,本領域的技術人員容易理解,實施例所描述的具體的物料配比、工藝條件及其結果僅用于說明本發明,而不應當也不會限制權力要求書中所詳細描述的本發明。
實施例1:
一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑:采用釀酒酵母為原料,將提取得到的核糖核酸進行酶解,然后將酶解液直接噴霧干燥,獲得含有四種核苷酸AMP、CMP、GMP、UMP的混合核苷酸,所述的混合核苷酸包含如下重量百分比的組分:混合核苷酸50%、粗蛋白18%、粗脂肪4%、灰分20%、水分8%。檢測四種核苷酸的含量,在此基礎上添加適量單核苷酸純品,使四種核苷酸之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=1.0:0.8:1.9:0.8,該添加劑中,核苷酸的總含量最終為61.3%。
實施例2:
一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑:采用面包酵母為原料,將提取得到的核糖核酸進行酶解,然后將酶解液直接噴霧干燥,獲得含有四種核苷酸AMP、CMP、GMP、UMP的混合核苷酸,所述的混合核苷酸包含如下重量百分比的組分:混合核苷酸42%、粗蛋白18%、粗脂肪6%、灰分25%、水分9%。然后在其基礎上添加適量單核苷酸純品,使四種核苷酸之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=1.5:1.2:1.6:1.5,該添加劑中,核苷酸的總含量最終為52.7%。
實施例3:
一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑:采用熱帶假絲酵母為原料,將提取得到的核糖核酸進行酶解,然后將酶解液直接噴霧干燥,獲得含有四種核苷酸AMP、CMP、GMP、UMP的混合核苷酸,所述的混合核苷酸包含如下重量百分比的組分:混合核苷酸60%、粗蛋白14%、粗脂肪2%、灰分19%、水分5%。,然后在其基礎上添加適量單核苷酸純品,使四種核苷酸之間的重量比為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.9:0.9:1.1 1.4,該添加劑中,核苷酸的總含量最終為69.3%。
實施例4:
一種羅非魚用核苷酸飼料添加劑,直接添加純度在99%以上的AMP鈉鹽、CMP鈉鹽、GMP鉀鹽和UMP,四種核苷酸之間的重量數之比為:腺苷酸鈉鹽:胞苷酸鈉鹽:鳥苷酸鉀鹽:尿苷酸=1.5:0.7:2.0:1.2。
實施例5
具體實驗方案:
1、飼養條件和分組
循環水養魚系統包括15個單個體積為60cm×60cm×65cm的塑料水族箱(有效水體200L)。水源為曝氣自來水,使用沸石、活性炭凈化水體,真空泵提水,單只箱體循環水量為1.5L/min,箱內放置散氣石,以通風管連接羅茨鼓風機間斷性充氧。養殖期間保存水體溶氧>6.0mg O/L,銨態氮<0.092mg N/L;自然水溫,變化范圍25.2~?28.5℃,10只8瓦節能日光燈提供照明,光照時間8:30?21:00,瞬時開斷。
奧尼羅非魚取自廣東江門良種魚苗養殖基地,2‰食鹽水消毒,實驗室循環水水族箱內暫養2周,暫養期間投喂基礎飼料。試驗飼料共5種,在基礎飼料中加入不同用量的核苷酸添加劑,基礎飼料及4種試驗飼料配方如下所示:
對照組:基礎飼料配方(見表1);
試驗組1:基礎飼料配方中添加1.0%實施例1中的核苷酸飼料添加劑;
試驗組2:基礎飼料配方中添加1.0%實施例2中的核苷酸飼料添加劑;
試驗組3:基礎飼料配方中添加1.0%實施例3中的核苷酸飼料添加劑;
試驗組4:基礎飼料配方中添加1.0%實施例4中的核苷酸飼料添加劑。
表1基礎飼料配方及化學組成

1維生素預混物(g/100g預混物):維生素A,550I.U.;維生素D3,100I.U.;維生素E,5I.U.;維生素K,1;,膽堿,55;尼氨酸,10;核黃素,2;吡哆醇,2;硫胺素,2;泛酸鈣,5;生物素,0.01;葉酸,0.5;維生素B12,2;抗壞血酸,10;肌醇,10.
2礦物鹽預混物(g/100g預混物):氯化納,1;硫酸鎂,15;磷酸二氫納,25;磷酸二氫鉀,32;磷酸二氫鈣,20;檸檬酸鐵,2.5;乳酸鈣,3.5;硫酸鋅,0.353;硫酸錳,0.162;硫酸銅,0.031;氯化鈷,0.001;碘酸鉀,0.003;纖維素,0.45.
2、飼養管理及實驗步驟
試驗開始前,將魚饑餓24h,然后隨機取樣稱重,每箱放入試驗魚35尾,每種飼料含3個平行。同時取3組魚樣(每組7尾),取兩側脊背處肌肉,70℃烘干至恒重,用以分析初始軀體肌肉生化組成。每箱留下7尾魚,注射濃度為3×109cfu/mL的嗜水氣單胞菌菌液,每尾注射1mL,觀察2周內羅非魚的死亡情況。
試驗總時間工共持續8周,每天9:00和15:00各投過量飼料一次,1小時后回收殘餌,70℃烘干。殘餌量用飼料溶失率校正,測定溶失率時隨機在3個無魚的箱中各放入1份已稱重的飼料,1小時后回收,70℃烘干至恒重并稱重。
實驗結束時,將魚饑餓24h,稱量每箱魚的總重,再從每箱中隨機取樣7尾,測量體長(精確到0.01cm)、體重(精確到0.1g),尾靜脈取血,部分血液中加肝素鈉抗凝,置于4℃冰箱暫時保存,稍后用作血細胞及血液部分生理生化指標分析;另一部分離心分離血清(轉速2000?3000r/min,持續15?20min),血清置于?70℃冰箱保存,用作后續生化指標分析。腸道去除腸系膜脂肪,稱重并測量全長(分別精確到0.001g、0.01cm),冰浴清洗,使用冰袋暫時冷藏保存,用作后續分析。
3、測定指標
測定魚肌肉和餌料的干物質、粗蛋白、脂肪和灰分含量,測定干物質時在105℃下干燥樣品至恒重,測定蛋白質時用凱氏定氮法測定含氮量,再乘以6.25,脂肪采用索氏乙醚抽提法測定,灰分采用馬弗爐550℃灼燒樣品測定。
測定超氧物歧化酶活性和血清中溶菌酶活性采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定,具體方法參見試劑盒。
采用酶聯免疫吸附測定法,使用上海江萊生物科技有限公司劑盒測定測定血清補體3和補體4含量,具體方法參照試劑盒說明書。
4、試驗結果和分析
4.1飼喂核苷酸對羅非魚生長性能的影響
添加核苷酸對羅非魚生產性能的影響,其結果見表2。對照組的羅非魚只喂養日常飼料,試驗組分別添加不同百分比的添加劑,腸長/體長指數有了明顯的增加,促進了魚體對飼料營養成份的吸收。魚體增重率分別比對照組提高了17.67%、11.79%、25.30%和14.65%,飼料系數分別比對照組降低了10.96%、6.16%、9.59%和3.42%,蛋白質效率比與對照組相比也有了顯著的提高。而且,日常基礎飼料中添加核苷酸后還明顯提高了羅非魚的肥滿度,提高了羅非魚的對環境的適應能力,從而提高了羅非魚的生長性狀和經濟價值。
表2飼喂核苷酸對羅非魚生長和飼料利用的影響

4.2飼喂核苷酸對羅非魚肌肉生化成份的影響
如表3所示,在日常飼料中添加本發明的核苷酸核苷酸添加劑后,羅非魚的營養價值有了明顯的提升。與對照組相比,四個試驗組羅非魚肌肉中干物質的含量都有所增高,灰分含量都有所降低,蛋白質的含量與對照組相比分別提高了2.95%、4.39%、3.64%和4.77%,脂肪含量分別降低了4.91%、7.49%、3.61%和2.07%。
表3核苷酸對奧尼羅非魚肌肉生化成分的影響

4.3飼喂核苷酸對羅非魚免疫能力的影響
超氧化物歧化酶和溶菌酶活性是評價魚類免疫力的常用指標。超氧化物歧化酶活性與機體免疫水平密切相關,對于增強巨噬細胞的防御功能和整個機體的免疫機能有重要作用。溶菌酶是一種重要的體液免疫因子,產生于嗜中性粒細胞和巨噬細胞,被分泌到血液及粘液中發揮溶菌效應。
如表4所示,試驗組超氧化物歧化酶和溶菌酶的活力顯著高于對照組,這表明核苷酸的添加大大改善了羅非魚的非特異性免疫功能。此外核苷酸的添加還激活了羅非魚的補體系統,促進抗體的產生以及干擾素的誘生。攻毒實驗更直觀的反映了核苷酸在提高羅非魚免疫力方面的作用效果,與對照組相比,核苷酸的添加大大提高了試驗組羅非魚對嗜水氣單胞菌的抵抗力,降低了活菌攻毒后的死亡率。
表4核苷酸對奧尼羅非魚非特異性免疫功能的影響

實施例6:
分別調整四種核苷酸的配方,與對照組對比進行優化實驗,結果見表5。通過優化,我們得到的配方為:腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸=0.9~1.5:0.7~1.2:1.1~2.0:0.8~1.5。其中最優配方為:1.2:0.9:1.6:1.2。
表5

注:配方比按以下排列=腺苷酸:胞苷酸:鳥苷酸:尿苷酸(重量比)。

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一種 羅非魚 核苷酸 飼料添加劑
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