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一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑及其制備方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201310301606.4

申請日:

2013.07.18

公開號:

CN103355290B

公開日:

2014.12.24

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A01N 25/14申請日:20130718|||公開
IPC分類號: A01N25/14; A01N63/02; A01P3/00 主分類號: A01N25/14
申請人: 江蘇省農業科學院
發明人: 劉永鋒; 孟祥坤; 尹小樂; 于俊杰
地址: 210014 江蘇省南京市鐘靈街50號
優先權:
專利代理機構: 江蘇圣典律師事務所 32237 代理人: 孫忠浩
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310301606.4

授權公告號:

103355290B||||||

法律狀態公告日:

2014.12.24|||2013.11.20|||2013.10.23

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑及其制備方法,包括有效活性成分、助劑和輔料,其特征在于,所述有效活性成分為枯草芽孢桿菌T500,所述助劑包括潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑,所述干懸浮劑中枯草芽孢桿菌T500活菌量為6.80×109~8.61×109cfu/g。制備方法是:將枯草芽孢桿菌T500菌株活化、移入種子罐中發酵培養、發酵罐中發酵培養,獲得發酵液;將所述助劑中的潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑以及輔料混合后與發酵液按0.15﹕1的重量/體積比混合攪拌均勻;將混合物干燥即得到枯草芽孢桿菌的干懸浮試劑。

權利要求書

權利要求書
1.  一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑,包括有效活性成分、助劑和輔料,其特征在于,所述有效活性成分為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) T500,所述助劑包括潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑,所述干懸浮劑中枯草芽孢桿菌T500活菌量為6.80×109~8.61×109cfu/g。

2.  根據權利要求1所述的一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑,其特征在于所述潤濕劑為脂肪醇聚氧乙烯醚,所述分散劑為萘磺酸鈉甲醛縮合物,所述粘結劑為羧甲基纖維素鈉 ,所述崩解劑為硫酸鈉,它們的質量比為1:4:1:5。

3.  根據權利要求1或2所述的一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑,其特征在于,所述輔料為高嶺土。

4.  一種如權利要求1所述枯草芽孢桿菌的干懸浮劑的制備方法,其特征在于:
a)將枯草芽孢桿菌T500菌株活化后進行培養,按接種量1:100~1:150將培養好的菌株移入種子罐中發酵培養12~24h,再按接種量1:100~1:150將種子罐中的發酵液移入大型發酵罐中發酵24~48h,獲得發酵液;
b)將所述助劑中的潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑以及輔料混合后與步驟a中發酵液按0.15﹕1的重量/體積比混合攪拌均勻;
c)采用噴霧干燥法,將b步驟中混合物在進風溫度110-120℃,進樣速度480-960ml/h,霧化壓力0.1-0.3MPa,熱風流量25-35M3/h的環境下干燥,即得到枯草芽孢桿菌的干懸浮試劑。

5.  根據權利要求4所述的一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑的制備方法,其特征在于,所述c步驟中進風溫度為120℃,進樣速度為720ml/h,霧化壓力為0.1MPa,熱風流量為30M3/h。

6.  根據權利要求4或5所述的一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑的制備方法,其特征在于,所述b步驟中潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑按質量比1:4:1:5與輔料混合,使得混合物中助劑占混合物總量的11%。

7.   根據權利要求6所述的一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑的制備方法,其特征在于,所述潤濕劑為脂肪醇聚氧乙烯醚,所述分散劑為萘磺酸鈉甲醛縮合物,所述粘連劑為羧甲基纖維素鈉,所述崩解劑為硫酸鈉,所述輔料為高嶺土。

說明書

說明書一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑及其制備方法
技術領域
本發明涉及一種枯草芽孢桿菌干懸浮劑及其制備方法。
背景技術
我國是一個傳統農業大國,在農作物生產過程中常常采用噴灑農藥的方式對植物的病蟲草害進行防治,保證生產豐收,但這些農藥的使用,將會給環境及人類造成一定的危害,近年來我國頻發爆出的農藥中毒事件也是在給社會敲響警鐘,開發出一種安全、環保的綠色殺菌劑已經是刻不容緩的責任。
枯草芽孢桿菌是一種理想的生防菌,對多種植物病原菌具有拮抗性,且具有無毒、無污染、無殘留且不易使病原菌產生抗藥性等特點,已被廣泛應用于生物農藥等多個領域。目前,已經成功開發并投入生產的枯草芽孢桿菌制劑對小麥紋枯病、水稻紋枯病、番茄枯萎病等多種農作物真菌病害具有良好的防治效果。
目前市場上枯草芽孢桿菌劑型主要以水劑、可濕性粉劑等傳統劑型。但水劑在貯存中容易分層沉淀,不易遠距離推廣保存;可濕性粉劑生產及施用時產生粉塵對操作人有害,在水中分散時出現“結塊”易堵塞噴頭,此外,在噴灑過程中易產生沉降引起噴藥前后濃度不一,這些都嚴重制約著枯草芽孢桿菌殺菌劑的推廣和應用。
干懸浮劑是一種安全、高效、經濟、方便且使用省力的新型農藥制劑。在第六屆國際農藥化學會議上,干懸浮劑被認為是一種高效、環保的農藥新劑型,是農藥劑型加工重要的發展方向。與傳統的農藥劑型相比,干懸浮劑具有固體制劑和液體制劑的優點,在水中能快速崩解,具有較好的分散性和懸浮性;其有效成份的顆粒細,單位質量的藥劑在作物表面的覆蓋面廣,具有較好的藥效;生產使用過程中無粉塵飛揚,減少對環境和操作者的危害,而且能制成高濃度的產品,減少貯運成本,易于推廣應用。
江蘇省農科院從水稻田土壤中分離獲得一株枯草芽孢桿菌 (Bacillus subtilis) T-500,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC,保藏編號:CGMCC NO:6058,該菌株已于2012年9月7日申請專利,其申請號為201210328716.5,公開號為CN102816725A,經室內平板測定及盆栽實驗證明,該菌株對水稻稻瘟病、稻曲病及紋枯病均有良好的防治效果。該菌株的前期試驗主要以發酵菌菌液直接進行,因此,專利申請時實施例中涉及該菌株,也僅僅局限于發酵菌液的使用方法上。目前,將該菌株制備成干懸浮劑并未見報道。隨著國家對糧食安全需求越來越高,為了防治水稻重要病害,迫切需要研究開發該菌株的新型高效活菌殺菌劑。
發明內容
本發明的目的在于:為了滿足水稻防治病害的需要,提供一種運輸和使用都很方便的枯草芽孢桿菌干懸浮劑,以及這種干懸浮劑的制備方法。
本發明的目的是這樣實現的:
一種枯草芽孢桿菌的干懸浮劑,包括有效活性成分、助劑和輔料,其特征在于,所述有效活性成分為枯草芽孢桿菌T500,所述助劑包括潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑,所述干懸浮劑中枯草芽孢桿菌T500活菌量為 6.80×109~8.61×109cfu/g。
在本發明中,所述潤濕劑為脂肪醇聚氧乙烯醚,所述分散劑為萘磺酸鈉甲醛縮合物,所述粘結劑為羧甲基纖維素鈉 ,所述崩解劑為硫酸鈉,它們的質量比為1:4:1:5。
在本發明中,所述輔料為高嶺土。
制備上述干懸浮劑的具體步驟如下:
a)將枯草芽孢桿菌T500菌株活化后進行培養,按接種量1:100~1:150將培養好的菌株移入種子罐中發酵培養12~24h,再按接種量1:100~1:150將種子罐中的發酵液移入大型發酵罐中發酵24~48h,獲得發酵液;
b)將所述助劑中的潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑以及輔料混合后與步驟a中發酵液按0.15﹕1的重量/體積比混合攪拌;
c)采用噴霧干燥法,將b步驟中混合物在進風溫度110-120℃,進樣速度480-960ml/h,霧化壓力0.1-0.3MPa,熱風流量25-35M3/h的環境下干燥,即得到枯草芽孢桿菌T500的干懸浮試劑。
在本發明中,所述c步驟中進風溫度為120℃,進樣速度為720ml/h,霧化壓力為0.1MPa,熱風流量為30M3/h。
在本發明中,所述b步驟中潤濕劑、分散劑、粘結劑、崩解劑按質量比1:4:1:5與輔料混合,使得混合物中助劑占混合物總量的11%。
在本發明中,所述潤濕劑為脂肪醇聚氧乙烯醚,所述分散劑為萘磺酸鈉甲醛縮合物,所述粘連劑為羧甲基纖維素鈉,所述崩解劑為硫酸鈉,所述輔料為高嶺土。
本發明與現有產品及其制備技術相比,本發明具有以下優點:
1. 解決了現有枯草芽孢桿菌制劑貯存時分層沉淀,施用時粉塵污染,噴藥前后濃度不一等問題。
2.分發明所制備的枯草芽孢桿菌T500分散性能好,活菌量高。
3.本發明的制備工藝相比其它造粒工藝易于實現連續化生產。
附圖說明
圖1是54℃條件下不同助劑對發酵菌液活菌量的影響。
圖中:RT-CK為常溫對照,54-CK為54℃對照,A1-A5為潤濕劑, B1-B65為分散劑, C1-C4為粘結劑, D1-D6為崩解劑。
具體實施方式
以下實施例用于說明本發明,但不用于限制本發明的范圍。
實施例1
將枯草芽孢桿菌T500菌株接種在YPGA斜面培養基活化后進行培養,按接種量1:100~1:150將培養好的菌株移入種子罐的YPG培養基中發酵培養12~24h,再按接種量1:100~1:150將種子罐中的發酵液移入大型發酵罐中發酵24~48h,獲得發酵液。發酵罐中的發酵培養基為玉米淀粉-豆粕粉培養基。
實施例2
篩選可用助劑,利用實施例1提供的發酵液,采用直接混合法,將農藥助劑參照適用比例與枯草芽孢桿菌發酵液混合,同時以不加助劑的發酵菌液為對照,放置54℃烘箱內14d,供試助劑包括潤濕劑、分散劑、粘結劑和崩解劑四類21種,參試助劑名稱和使用比例見表1。
表1 篩選用助劑種類名稱及使用比例     

由表1可見,大部分都有不同程度的下降,其中潤濕劑A5、分散劑B6對活菌量的影響較大,下降顯著。而潤濕劑A2、分散劑B3、粘結劑C3、崩解劑D2和D4處理菌液與對照相比下降不顯著,分析這四種助劑對枯草芽孢桿菌影響不明顯,各助劑培養后的活菌量如圖1所示。最終選定:潤濕劑為A2脂肪醇聚氧乙烯醚,分散劑為B3萘磺酸鈉甲醛縮合物,粘連劑為C3羧甲基纖維素鈉,所述崩解劑為D4硫酸鈉或D2尿素。
實施例3
利用實施例1對枯草芽孢桿菌T500菌株活化培養后,與實施例3選定的四種助劑及農藥用填料高嶺土進行混合攪拌均勻,獲得活菌量為1.8*109cfu/ml的菌液。
實施例4
采用噴霧干燥法,通過正交優化試驗,在進風溫度110-120℃,進樣速度480-960ml/h,霧化壓力0.1-0.3MP、熱風流量25-35 M3/h條件中選擇最佳條件。
 反應后測得干懸浮劑活菌量及分析結果如表2所示:
表2 反應后測得干懸浮劑活菌量及分析結果

由表2可見,均值與極差分析結果可選定最佳噴霧干燥條件為:進風溫度120℃,進樣速度720ml/h,霧化壓力0.1MP、熱風流量25M3/h。
實施例5
取實施例1獲得的發酵液;取實施例2選定的潤濕劑脂肪醇聚氧乙烯醚(平平加)、分散劑萘磺酸鈉甲醛縮合物(NNO)、粘結劑羧甲基纖維素鈉(CMC)、崩解劑硫酸鈉,根據農藥助劑常用比例,以質量比1:4:1:5與輔料高嶺土混合,使得混合物中助劑占混合物總量的11%,混合物總量與第一步中的發酵液以0.15﹕1的重量/體積比混合攪拌均勻,混合物總量的單位為kg,發酵液的單位為L;然后采用噴霧干燥法,操作參數為:混合物的進風溫度120℃,進樣速度720ml/h,霧化壓力0.1MPa,熱風流量30M3/h,在此條件下,本實施例獲得噴霧干燥后產物中,活菌數達8×109 cfu/g。

關 鍵 詞:
一種 枯草 芽孢 桿菌 懸浮 及其 制備 方法
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