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熒光造影劑及其制備方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201310153122.X

申請日:

2013.04.27

公開號:

CN103239737B

公開日:

2015.01.07

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A61K 49/00申請日:20130427|||公開
IPC分類號: A61K49/00 主分類號: A61K49/00
申請人: 深圳先進技術研究院
發明人: 蔡林濤; 胡德紅; 盛宗海; 方勝濤; 王亞楠; 高篤陽; 龔萍; 張鵬飛
地址: 518055 廣東省深圳市南山區西麗大學城學苑大道1068號
優先權:
專利代理機構: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 代理人: 吳平
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310153122.X

授權公告號:

103239737B||||||

法律狀態公告日:

2015.01.07|||2013.09.11|||2013.08.14

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明提供一種熒光造影劑,包括金納米簇、腫瘤特異性標志物的抗體及考馬斯亮藍,金納米簇與腫瘤特異性標志物的抗體通過點擊化學方式連接,考馬斯亮藍與連接有腫瘤特異性標志物的抗體的金納米簇通過靜電方式結合。該熒光造影劑具有裸眼可視的特性。此外,本發明還提供一種熒光造影劑的制備方法,該方法工藝步驟簡單,適合產業化生產。

權利要求書

權利要求書
1.   一種熒光造影劑,其特征在于,包括金納米簇、腫瘤特異性標志物的抗體及考馬斯亮藍,所述金納米簇與所述腫瘤特異性標志物的抗體通過點擊化學方式連接,所述考馬斯亮藍與所述連接有所述腫瘤特異性標志物的抗體的金納米簇通過靜電方式結合。

2.   根據權利要求1所述的熒光造影劑,其特征在于,所述金納米簇、所述腫瘤特異性標志物的抗體及所述考馬斯亮藍的摩爾比為1~10:1~100:1~100。

3.   根據權利要求1所述的熒光造影劑,其特征在于,所述點擊化學方式連接為所述金納米簇表面修飾的疊氮基與所述腫瘤特異性標志物的抗體表面修飾的炔基發生點擊化學反應而連接。

4.   根據權利要求1所述的熒光造影劑,其特征在于,所述金納米簇的粒徑為0.5~2nm。

5.   根據權利要求1所述的熒光造影劑,其特征在于,所述腫瘤特異性標志物的抗體為乳腺癌的抗HER2蛋白抗體、乳腺癌的抗P53蛋白抗體、乳腺癌的抗p185蛋白抗體、肺癌的CEA單克隆抗體或抗人肺癌單克隆抗體(McAb)N?35。

6.   一種熒光造影劑的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
將濃度為1~100mmol/L的氯金酸溶液與濃度為1~500mg/mL的牛血清白蛋白或人血清白蛋白溶液混合均勻,然后加入濃度為0.1~10mol/L的NaOH溶液,并于搖床中于0~100℃下溫育3~100小時,得到金納米簇,其中,所述NaOH與所述氯金酸的摩爾比為1:1~1:100;
將所述金納米簇與經NHS預處理的疊氮化試劑按照摩爾比為1:1~1:100的比例混合,得到表面修飾有疊氮基的金納米簇;
將腫瘤特異性標志物的抗體與炔基化試劑按照摩爾比為1:1~1:100的比例混合均勻并反應0.5小時,反應液經純化處理后,得到表面修飾有炔基的腫瘤特異性標志物的抗體;
將所述表面修飾有疊氮基的金納米簇與所述表面修飾有炔基的腫瘤特異性標志物的抗體按照摩爾比為1:1~1:100的比例混合均勻,并孵育0.5小時,得到連接有腫瘤特異性標志物的抗體的金納米簇;
將考馬斯亮藍與所述連接有腫瘤特異性標志物的抗體的金納米簇混合,并并孵育0.5小時,得到所述熒光造影劑,其中,所述考馬斯亮藍與所述金納米簇的摩爾比為100:1~1:1。

7.   根據權利要求6所述的熒光造影劑的制備方法,其特征在于,所述疊氮化試劑為N3?PEG8?CH2CH2NH2、6?TET Azide或6?HEX Azide。

8.   根據權利要求6所述的熒光造影劑的制備方法,其特征在于,所述炔基化試劑為DBCO?sulfo?NHS Ester或DBCO?PEG4?NHS ester。

9.   根據權利要求6所述的熒光造影劑的制備方法,其特征在于,所述純化處理的具體過程為:將反應液轉入透析袋中,在室溫下,于10~5000mL PBS緩沖液內透析1~300小時,每1~12小時換液一次,然后于10~5000mL雙蒸餾水內透析1~12小時。

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熒光 造影 及其 制備 方法
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