• / 17
  • 下載費用:30 金幣  

一種灰楸的組織培養方法.pdf

摘要
申請專利號:

CN201310109903.9

申請日:

2013.03.29

公開號:

CN103190344B

公開日:

2015.01.07

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||著錄事項變更IPC(主分類):A01H 4/00變更事項:發明人變更前:王軍輝變更后:王軍輝 張守攻 于永明 馬建偉|||實質審查的生效IPC(主分類):A01H 4/00申請日:20130329|||公開
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 中國林業科學研究院林業研究所
發明人: 王軍輝; 張守攻; 于永明; 馬建偉
地址: 100091 北京市海淀區頤和園后東小府1號院
優先權:
專利代理機構: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 代理人: 王朋飛;張慶敏
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201310109903.9

授權公告號:

103190344B|||||||||

法律狀態公告日:

2015.01.07|||2014.12.31|||2013.08.07|||2013.07.10

法律狀態類型:

授權|||著錄事項變更|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種灰楸組織培養方法,包括:采集灰楸母樹一年生萌生枝條依次進行枝條水培催芽、無菌化處理、芽的誘導和增殖、不定芽生根培養、煉苗與移栽,得到灰楸組培苗。本發明方法選擇特定的健壯無病蟲害灰楸母本,通過特定的組織培養技術和培養條件,能夠在短時間內獲得大批量優質灰楸組培苗,滿足科研和生產所需;與其他繁殖方法相比,本發明需要的母本材料少,有1~2個莖段即可大批量繁殖,且更好地保持母本的優良性狀,將幼苗移栽室外,成活率能達到95%以上;繁殖速度快,苗木質量好,出苗率高;無需培育砧木與接穗,極大地減少占地面積,并降低人力及管理成本。

權利要求書

權利要求書
1.   一種灰楸組織培養方法,包括:采集灰楸母樹一年生萌生枝條依次進行枝條水培催芽、無菌化處理、芽的誘導和增殖、不定芽生根培養、煉苗與移栽,得到灰楸組培苗。

2.   根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述枝條水培催芽包括:采集灰楸母樹一年生萌生枝條,在室內水培催芽后,摘取萌發芽。

3.   根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述無菌化處理包括:將水培催芽后的萌發芽用自來水沖洗30min,之后用質量濃度為10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,之后再經無菌水沖洗4~5次,最后用無菌濾紙吸干表面水分。

4.   根據權利要求1~3任意一項所述的方法,其特征在于,所述芽的誘導分化和增殖包括:將無菌化處理過的萌發芽截成莖段,然后接種于誘導培養基上,培養35~50天,得到分化芽;然后再將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上,培養30~45天后形成不定芽。

5.   根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述芽的誘導和增殖培養所用培養基為DKW基本培養基,還包括:0.6~1.4mg·L?16?BA,0.1~0.3mg·L?1IBA,25g·L?1蔗糖和4.5g·L?1瓊脂;優選為:DKW基本培養基,還包括:0.75~1.2mg·L?16?BA,0.13~0.23mg·L?1IBA,25g·L?1蔗糖和4.5g·L?1瓊脂;所述芽的誘導分化和增殖培養基的pH為5.8。

6.   根據權利要求1~5任意一項所述的方法,其特征在于,所述不定芽生根培養包括:將增殖分化得到的不定芽截成莖段,轉接入生根培養基中誘導生根,28~40天后長成生根苗。

7.   根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述不定芽生根培養所用的培養基為1/2MS基本培養基,還包括:0.25~0.35mg·L?1IBA,0.025~0.035mg·L?1NAA,10g·L?1蔗糖和5.0g·L?1瓊脂;優選為:1/2MS基本培養基,還包括:0.28~0.32mg·L?1IBA,0.029~0.032mg·L?1NAA,10g·L?1蔗糖和5.0g·L?1瓊脂;所述不定芽生根培養基的pH為5.8。

8.   根據權利要求1~7任意一項所述的方法,其特征在于,所述煉苗與移栽包括:將不定芽生根培養出的生根苗置于溫室中煉苗后移栽,移栽后遮陰;生根苗移栽的基質為泥炭土:珍珠巖=3~5:1,優選4:1。

9.   根據權利要求8所述的方法,其特征在于,生根苗移栽的基質還可包含多菌靈,用量為200g/m3。

10.   根據權利要求4~9任意一項所述的方法,其特征在于,所述的芽的誘導分化和增殖、不定芽生根培養的溫度均為22~26℃,光照強度均為1800~2200勒克斯,光照時間均為12~15小時/每天。

說明書

說明書一種灰楸的組織培養方法
技術領域
本發明涉及一種木本植物的組織培養方法,尤其是涉及一種灰楸的組織培養方法。
背景技術
灰楸(Catalpa fargesii)為紫葳科(Bignoniaceae)梓樹屬(Catalpa)高大落葉喬木,是我國傳統栽培的優質珍貴用材及園林觀賞樹種。其分布范圍廣,主要分布于我國中西部地區,以渭河、涇河、汾河流域及秦嶺山地為集中區,散生于村莊周邊及山谷中。灰楸根系發達,生長速度快,抗風、固土能力強,耐寒耐旱,材質紋理通直、堅韌致密,是優質速生用材樹種。
通常,灰楸通過嫁接和扦插來繁殖。嫁接繁殖需提前1年培育砧木(梓樹),翌年采集母本1年生枝條或苗干上的芽作為接穗;嫁接過程中,由于接穗直徑生長一般大于砧木,導致接口愈合較差,成活率一般在70%左右,嫁接苗抗風性較弱,且砧木基部多萌芽,需不斷抹芽,增加了管理成本。扦插繁殖需采集當年生枝條、苗干或根進行埋干(根)催芽,采集半木質化嫩枝進行扦插,對催芽床和扦插床溫、濕度及空氣相對濕度要求較為嚴格,管理成本高,扦插成活率較低,一般為50%左右。
組織培養是一種高效的無性繁殖方式,繁殖效率高且成本較低,是解決灰楸優良無性系快繁的有效手段,目前尚未見有關灰楸優良無性系組織培養方面的報道。
發明內容
為了克服嫁接和扦插等無性繁殖技術存在的不足,本發明的目的在于提供一種灰楸的組織培養方法,該方法可以高效地獲得優質的灰楸組培苗。
本發明提供的灰楸組織培養方法,包括:采集灰楸母樹一年生萌生枝條依次進行枝條水培催芽、無菌化處理、芽的誘導和增殖、不定芽生根培養、煉苗與移栽,得到灰楸組培苗。
所述枝條水培催芽包括:采集灰楸母樹一年生萌生枝條,在室內水培(自來水)催芽后,摘取萌發芽。最好待萌發芽長度為10cm左右,最優選8~12cm時摘取。
所述無菌化處理包括:將水培催芽后的萌發芽用自來水沖洗30min,之后用質量濃度為10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,之后再經無菌水沖洗4~5次,最后用無菌濾紙吸干表面水分。
所述芽的誘導和增殖包括:將無菌化處理過的萌發芽截成莖段,然后接種于誘導培養基上,培養35~50天,得到分化芽;然后再將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上,培養30~45天后形成不定芽。
優選地,無菌化處理過的萌發芽截成的莖段,以及分化芽截成莖段上至少有一個腋芽。
更優選地,所述芽的誘導和增殖包括:將無菌化處理過的萌發芽截成長度為1.5cm左右,最優選1.4~1.6cm的莖段,然后接種于誘導培養基上,培養35~50天,得到分化芽;然后再將該分化芽截成長度為1.0cm左右,最優選0.8~1.2cm的莖段接種于增殖培養基上,培養30~45天后形成不定芽。
其中,所述芽的誘導分化和增殖培養所用培養基為DKW基本培養基,還包括:0.6~1.4mg·L?16?BA(6?芐基氨基嘌呤,benzylaminmopurine),0.1~0.3mg·L?1IBA(吲哚丁酸,Indole?3?Butytric acid),25g·L?1蔗糖和4.5g·L?1瓊脂。優選為:DKW基本培養基,0.75~1.2mg·L?16?BA,0.13~0.23mg·L?1IBA,25g·L?1蔗糖和4.5g·L?1瓊脂。
進一步地,所述芽的誘導分化和增殖培養基的pH為5.8。
進一步地,芽的誘導分化過程中,培養3天后,莖段腋芽處芽開始膨大;8~10天莖段基部愈傷組織開始膨大;共誘導培養35~50天(優選40~48天)分化芽的芽長大于0.7cm。
進一步地,將該分化芽截成莖段接種于增殖培養基上,培養8~10天后開始增殖分化形成不定芽,30~45天(優選34~40天)后不定芽可以長到1.0cm以上。
所述不定芽生根培養包括:將增殖得到的不定芽截成莖段,轉接入生根培養基中誘導生根,28~40天后長成生根苗。
其中,所述不定芽生根培養所用的培養基為1/2MS基本培養基,還包括:0.25~0.35mg·L?1IBA,0.025~0.035mg·L?1NAA(萘乙酸,1?naphthlcetic acid),10g·L?1蔗糖和5.0g·L?1瓊脂。優選為:1/2MS基本培養基,0.28~0.32mg·L?1IBA,0.029~0.032mg·L?1NAA,10g·L?1蔗糖和5.0g·L?1瓊脂。
進一步地,所述不定芽生根培養基的pH為5.8。
優選地,將不定芽截成至少帶一葉片的莖段。
更優選地,30~45天后,將不定芽截成1.5cm左右長的莖段。
其中,不定芽在誘導生根過程中,5~6天后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,8~10天后開始生根,28~40天(優選30~40天)后即得到生根苗(28~40天(優選30~40天)后幼苗可長1.0~2.5cm)。
所述煉苗與移栽包括:將不定芽生根培養出的生根苗置于溫室中煉苗(16~20天)后移栽,移栽后用遮陰網遮陰。
其中,生根苗置于溫室中適應環境6~8天松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10~12天后移栽。
其中,生根苗移栽的基質為泥炭土:珍珠巖(V/V)=3~5:1,優選4:1。
進一步地,生根苗移栽的基質還可包含多菌靈,用量為200g/m3。
其中,所述的芽的誘導和增殖、不定芽生根培養的溫度均為22~26℃,光照強度均為1800~2200勒克斯(lx),光照時間均為12~15小時/每天。優選:光照強度均為2000勒克斯(lx),光照時間均為14小時/天。
和現有的楸樹的組織培養方法相比:
①楸樹和灰楸的區別:楸樹和灰楸是都屬于紫葳科梓樹屬的兩個不同的種,其分布區、生長、適應性、材性具有很大的差異;
②楸樹已有成熟的組織培養方法,但是目前還未有成熟的灰楸組織培養方法,依據目前所具有的楸樹組織培養方法,無法正常、高效進行灰楸的組織培養。
因此,本發明方法選擇特定的健壯無病蟲害灰楸母本,通過特定的組織培養技術和培養條件,能夠在短時間內獲得大批量優質灰楸組培苗,滿足科研和生產所需。與其他繁殖方法相比,本發明需要的母本材料少,有1~2個莖段即可大批量繁殖,且更好地保持母本的優良性狀,將幼苗移栽室外,成活率能達到95%以上;繁殖速度快,苗木質量好,出苗率高;無需培育砧木與接穗,極大地減少占地面積,并降低人力及管理成本。
附圖說明
圖1為根據實施例1水培催芽30天后得到的萌發芽。
圖2為根據實施例1無菌化材料培養誘導15天后得到的分化芽。
圖3為根據實施例1無菌化材料誘導培養45天后得到的分化芽。
圖4為根據實施例1分化芽轉接誘導增殖40天后得到的不定芽。
圖5為根據實施例1不定芽轉接生根誘導培養30天后得到的生根苗。
圖6為根據實施例1不定芽轉接生根誘導培養30天后得到的生根苗根系。
具體實施方式
以下實施例用于說明本發明,但不用來限制本發明的范圍;在不背離本發明精神和實質的情況下,對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換,均屬于本發明的保護范圍。
本發明所涉及的基本培養基的配方如下:
DKW基本培養基的標準配方:

MS基本培養基(Murashing and Skoog medium,1962)的標準配方:

1/2基本MS培養基,即大量元素組成成分各減半(其他元素不減半)的MS培養基(Murashing and Skoog medium,1962)的標準配方:


若未特別指明,實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。
本發明取灰楸母樹一年生萌生條進行水培催芽,具體為:取灰楸母樹一年生萌生枝條,在室內水培(自來水)催芽,待芽長10cm左右摘取。
本發明所給出的天數,都是從開始培養起進行計算的。
實施例1
一種灰楸的組織培養方法,取灰楸母樹一年生萌生枝條,在室內進行水培(自來水)催芽,待萌發呀長度達到8cm以上后,摘取萌發芽(如圖1所示),接下來包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+1.0mg·L?16?BA+0.2mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,9d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,待分化芽的芽長大于1.0cm后(誘導培養共45天),取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,35d后可以長到2.2cm,增殖系數為8.8。
(3)不定芽的生根培養
取長度大于1.5cm的增殖分化芽,截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.3mg·L?1IBA+0.03mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),5d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,10d后開始生根,共生根培養30d后幼苗可長1.2cm。
(4)煉苗與移栽
生根培養根系長至2.5cm時(生根培養30~40d后),將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為99%。生根苗移栽的基質為泥炭土:珍珠巖(V/V)=4:1,并且用多菌靈滅菌,用量為200g/m3。芽的誘導和增殖、不定芽生根培養的溫度均為25℃,光照強度均為2000勒克斯(lx),光照時間均為14小時/每天。
培養過程中,各階段的圖片如圖2~圖6所示。
實施例2
一種灰楸的組織培養方法,在取灰楸母樹一年生萌生枝條進行水培催芽后,包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+0.8mg·L?16?BA+0.15mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導分化和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,10d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,培養40d后分化芽芽數達到5個,芽長2.86cm;取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,36d后增殖分化芽數4.7個,分化芽長2.97cm,增殖系數為14。
(3)不定芽的生根培養
取增殖分化芽(長度大于1.5cm),截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.31mg·L?1IBA+0.029mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),5d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,10d后開始生根,32d后幼苗發根數為1.13個,根長0.734cm,幼苗新芽長1.197cm。
(4)煉苗與移栽
生根培養36d后,將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為98%。其他條件同實施例1。
實施例3
一種灰楸的組織培養方法,在取灰楸母樹一年生萌生條進行水培催芽后,包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+1.2mg·L?16?BA+0.16mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導分化和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,8d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,培養38d后分化芽芽數3.43個,芽長0.765cm;取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,34d后增殖分化芽數3.567個,分化芽長1.672cm,增殖系數為6.0。
(3)不定芽的生根培養
取長度大于1.5cm的增殖分化芽,截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.29mg·L?1IBA+0.03mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),5d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,10d后開始生根,36d后幼苗發根數為3.3個,根長0.906cm,幼苗新芽長0.736cm。
(4)煉苗與移栽
生根培養32d后,將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為96%。其他條件同實施例1。
實施例4
一種灰楸的組織培養方法,在取灰楸母樹一年生萌生條進行水培催芽后,包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+0.9mg·L?16?BA+0.2mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導分化和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,10d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,培養48d后分化芽芽數2個,芽長0.506cm;取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,43d后增殖分化芽數4.033個,分化芽長1.893cm,增殖系數為7.6。
(3)不定芽的生根培養
取增殖分化芽(長度大于1.5cm),截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.32mg·L?1IBA+0.031mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),6d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,8d后開始生根,38d后幼苗發根數為1.433個,根長1.249cm,幼苗新芽長0.488cm。
(4)煉苗與移栽
生根培養30d后,將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為99%。其他條件同實施例1。
實施例5
一種灰楸的組織培養方法,在取灰楸母樹一年生萌生條進行水培催芽后,包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+0.75mg·L?16?BA+0.23mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導分化和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,10d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,培養44d后分化芽芽數4.333個,芽長1.1cm;取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,45d后增殖分化芽數7.037個,分化芽長1.992cm,增殖系數為14.0。
(3)不定芽的生根培養
取增殖分化芽(長度大于1.5cm),截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.3mg·L?1IBA+0.032mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),5d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,10d后開始生根,40d后幼苗發根數為2.8個,根長0.801cm,幼苗新芽長0.764cm。
(4)煉苗與移栽
生根培養35d后,將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為96%。其他條件同實施例1。
實施例6
一種灰楸的組織培養方法,在取灰楸母樹一年生萌生條進行水培催芽后,包括以下步驟:
(1)無菌化處理
摘取灰楸枝條水培催芽后的萌發芽,去掉所有葉片,用自來水沖洗30min,在超凈工作臺上用10%的次氯酸鈉溶液浸泡6~7min,經無菌水沖洗4~5次后用無菌濾紙吸干表面水分,將芽截成1.5cm長的莖段(保證莖段上至少有一個腋芽)接種于誘導培養基:DKW基本培養基+1.1mg·L?16?BA+0.13mg·L?1IBA+25g·L?1蔗糖+4.5g·L?1瓊脂(pH5.8)上。
(2)芽的誘導分化和增殖
莖段接種于誘導培養基3d后,莖段腋芽處芽開始膨大,8d左右莖段基部愈傷組織開始膨大,培養45d后分化芽芽數1.143個,芽長0.131cm;取分化芽截成1.0cm的莖段,轉接于增殖培養基(成分與誘導培養基相同)上,培養10d后開始增殖分化形成不定芽,50d后增殖分化芽數4.37個,分化芽長2.437cm,增殖系數為10.7。
(3)不定芽的生根培養
取增殖分化芽(長度大于1.5cm),截成長度為1.5cm帶一葉片莖段,轉接入生根培養基:1/2MS基本培養基+0.28mg·L?1IBA+0.029mg·L?1NAA+10g·L?1蔗糖+5.0g·L?1瓊脂(pH5.8),5d后莖段基部開始膨大發綠,并有淡綠色針眼大小顆粒產生,9d后開始生根,30d后幼苗發根數為0.867個,根長0.679cm,幼苗新芽長0.706cm。
(4)煉苗與移栽是
生根培養40d后,將生根瓶苗置于溫室,適應環境7d左右松開封瓶繩,隔天將瓶膜松開,10d左右移栽,移栽時洗凈根部培養基,移栽后及時覆膜(每天噴水3次),遮陰,7d后松膜,10d后揭膜,40d后移栽室外,進入田間管理,移栽成活率為95%。其他條件同實施例1。
以上所述僅是本發明的優選實施方式,應當指出,對于本技術領域的技術人員來說,在不脫離本發明技術原理的前提下,還可以做出部分改進和潤飾,這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。

關 鍵 詞:
一種 組織培養 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
關于本文
本文標題:一種灰楸的組織培養方法.pdf
鏈接地址:http://www.rgyfuv.icu/p-6419269.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
山东11选5中奖结果走势图