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一種抑制根結線蟲的微生物制劑及其制備方法與應用.pdf

摘要
申請專利號:

CN201210581016.7

申請日:

2012.12.28

公開號:

CN103039534B

公開日:

2014.11.05

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授權

有效性:

有權

法律詳情: 專利權的轉移IPC(主分類):A01N 63/04登記生效日:20171212變更事項:專利權人變更前權利人:李峰變更后權利人:河北愛民生物科技有限公司變更事項:地址變更前權利人:437400 湖北省咸寧市通城縣大坪鄉李家村二組變更后權利人:062550 河北省任丘市西環路辦事處后長洋村|||授權|||實質審查的生效IPC(主分類):A01N 63/04申請日:20121228|||公開
IPC分類號: A01N63/04; A01N63/02; A01P5/00; A01P21/00 主分類號: A01N63/04
申請人: 李峰
發明人: 李峰
地址: 437400 湖北省咸寧市通城縣大坪鄉李家村二組
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201210581016.7

授權公告號:

|||103039534B||||||

法律狀態公告日:

2017.12.29|||2014.11.05|||2013.05.15|||2013.04.17

法律狀態類型:

專利申請權、專利權的轉移|||授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明屬于農作物蟲害生物防治領域,提供了一種抑制根結線蟲的微生物制劑,該制劑由除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液混合甘油而成,本發明還提供了該抑制根結線蟲的微生物制劑的生產方法和應用效果,該微生物制劑含有大于25億/毫升數量的包括除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活菌,施入土壤后通過活菌不斷生長繁殖活動產生的代謝物殺死根結線蟲卵,改善土壤團粒結構、提高肥料利用率達到增產增收的作用。

權利要求書

權利要求書一種抑制根結線蟲的微生物制劑,其特征在于,由除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液和甘油按比例混合而成,四株菌在甘油的配合下互不拮抗,而且保存時間可超過2年。
根據權利要求1所述的抑制根結線蟲的微生物制劑,其特征在于所述除蟲鏈霉菌菌液30—40%,淡紫擬青霉菌液10—20%,厚垣輪枝菌20—30%,球形芽孢桿菌10—30%,甘油20%;各菌液混合后的有效總活菌數大于25億/毫升。
一種權利要求所述抑制根結線蟲的微生物制劑的生產方法,該方法包括下述步驟:
(1)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌、球形芽孢桿菌的原始菌種活化待搖瓶培養;
(2)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活化菌種搖瓶培養,獲得搖瓶種子;
(3)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子分別在發酵罐二級放大培養成待混合的菌液;
(4)將滅菌后的甘油及發酵后待混合的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液按比例混合即得。
權利要求1—3任一所述的抑制根結線蟲的微生物制劑在蔬菜、瓜果及煙草的根結線蟲抑制效果,其特征在于所述抑制根結線蟲微生物制劑含有大于25億/毫升數量的包括除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活菌,施入土壤后通過活菌的不斷生長繁殖活動,分泌適量的阿維菌素、除蟲素、胞外酶及根系促生因子;通過微生物細胞分泌并通過底物抑制機制維持的適量濃度的阿維菌素和除蟲素能夠殺死土壤及根系中的線蟲卵,使根結線蟲的發病率降低85%以上,避免使用其他農藥的過量使用;通過微生物細胞分泌的胞外酶和根系促生因子能夠改善土壤的團粒結構,提高土壤的保水保肥能力同時促進根系的發達從而提高作物的肥料營養吸收和提高作物的抗性,可以促進增產增收30%以上。

說明書

說明書一種抑制根結線蟲的微生物制劑及其制備方法與應用
技術領域
本發明屬于農作物蟲害生物防治領域,涉及一種抑制根結線蟲的微生物制劑及其制備方法與應用。 
背景技術
自從1932年首次報道我國南方番茄發生根結線蟲病以來,全國十余個省區都有根結線蟲病的發生和危害。近年來,我國保護地蔬菜發展迅速,溫室連年種植同種蔬菜作物,致使許多老齡溫室根結線蟲病害日趨嚴重,已造成了蔬菜的大幅度減產,給菜農們帶來了巨大地經濟損失。一般每年造成20%—25%的經濟損失,嚴重的損失50%—60%,甚至絕產。因此,對根結線蟲的危害治理已成為一項非常重要的農業生產任務。目前市場上殺線蟲的主要方法為化學殺線劑,如利用溴甲烷、有機磷化合物及抗生素等進行土壤消毒。傳統的化學殺線劑不僅使用成本高,而且環境相容性差,破壞了土壤的結構。隨著綠色消費觀念的形成和迅速普及,迫切需要開發出安全、高效、低毒的新型生物合理殺線劑。 
發明內容
本發明的目的是提供一種抑制根結線蟲的微生物制劑。 
本發明的目的還在于提供該抑制根結線蟲的微生物制劑的制備方法。 
本發明的目的還在于提供該抑制根結線蟲的微生物制劑在蔬菜、瓜果及煙草等農業種植方面的抑制根結線蟲的應用效果。 
本發明的目的還在于使用該抑制根結線蟲的微生物制劑能夠提高化肥利用率,減少重茬病害和農藥用量,提高農作物產品的安全性。 
本發明提供了一種抑制根結線蟲的微生物制劑,由除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液混合甘油而成,四株菌互不拮抗,保存時間長。 
其中,所述各菌菌液的分量按體積百分比優選為除蟲鏈霉菌菌液30—40%,淡紫擬青霉菌液10—20%,厚垣輪枝菌20—30%,球形芽孢桿菌10—30%,甘油20%;各菌液混合后的有效總活菌數大于25億/毫升。 
本發明還提供了所述抑制根結線蟲的微生物制劑的制備方法。該制備方法包括下述步驟: 
(1)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌、球形芽孢桿菌的原始菌種活化待搖瓶培養。
(2)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活化菌種搖瓶培養,獲得搖瓶種子。 
(3)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子分別在發酵罐二級放大培養成待混合的菌液。 
(4)將滅菌后的甘油及發酵后待混合的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液按比例混合即得。 
所述步驟(1)中除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌的活化都在培養皿中進行,培養溫度分別為32攝氏度,35攝氏度和32攝氏度,培養基按照標準的真菌培養基配料,培養時間為1天;球形芽孢桿菌的活化在試管斜面上進行,培養溫度為35攝氏度,培養基成分為標準的細菌培養基,培養時間為1天。 
所述步驟(2)中各菌種的搖瓶種子的培養參數和步驟(1)中的培養參數相同,只是將培養基改為液體培養基,置于在500mL的搖瓶中200轉/分鐘的轉速培養,培養時間為2天。 
所述步驟(3)中除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子在發酵罐二級放大培養,指將搖瓶中的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子分別接種在500L的發酵罐中培養,四株菌的培養基成分都為含10%的土豆泥、3%的豆粕粉的水溶液。培養溫度為步驟(1)所述各菌種的培養溫度,發酵罐轉速為150轉/分鐘,通氣量系數都為0.5,培養時間為27小時。 
本發明還提供了抑制根結線蟲的微生物制劑在蔬菜、瓜果及煙草等農業種植方面的抑制根結線蟲的應用方法,其特征在于:種植蔬菜、瓜果及煙草前耕地時均勻潑灑,每次使用量5L/畝。 
  
本發明還提供了抑制根結線蟲的微生物制劑在抑制蔬菜、瓜果及煙草根結線蟲的應用效果。其特征在于:所述抑制根結線蟲微生物制劑含有大于25億/毫升數量的包括除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活菌,施入土壤后通過活菌的不斷生長繁殖活動,分泌適量的阿維菌素、除蟲素、胞外酶及根系促生因子。通過微生物細胞分泌并通過底物抑制機制維持適量濃度的阿維菌素和除蟲素能夠殺死土壤及根系中的線蟲卵,使根結線蟲的發病率降低85%以上,避免使用其他農藥的過量使用;通過微生物細胞分泌的胞外酶和根系促生因子能夠改善土壤的團粒結構,提高土壤的保水保肥能力同時促進根系的發達從而提高作物的肥料營養吸收提高作物的抗性,可以促進增產增收30%以上。
附圖說明
圖1:沒用發明產品的芹菜根系與使用過發明產品的芹菜根系對比,使用過發明產品的根系發達,毛細根多,明顯沒有根結線蟲導致的根結。
具體實施方式
抑制根結線蟲的微生物制劑各微生物菌劑的組分和體積比為:除蟲鏈霉菌菌液30—40%,淡紫擬青霉菌液10—20%,厚垣輪枝菌20—30%,球形芽孢桿菌10—30%,甘油20%; 
所述抑制根結線蟲的微生物制劑按照下列工藝步驟生產:
(1)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌、球形芽孢桿菌的原始菌種在微生物實驗室活化待搖瓶培養。
其中除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌的活化都在培養皿中進行,培養溫度分別為32攝氏度,35攝氏度和32攝氏度,培養基按照標準的真菌培養基配料,培養時間為1天;球形芽孢桿菌的活化在試管斜面上進行,培養溫度為35攝氏度,培養基成分為標準的細菌培養基,培養時間為1天。 
(2)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的活化菌種搖瓶培養,獲得搖瓶種子。 
各菌種的搖瓶種子的培養參數和步驟(1)中的培養參數相同,只是將培養基改為液體培養基,放在500mL的搖瓶中200轉/分鐘的轉速培養,培養時間為2天。 
(3)分別將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子分別在發酵罐二級放大培養成待混合的菌液。 
將搖瓶中的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌及球形芽孢桿菌的搖瓶種子分別接種在500L的發酵罐中培養,四株菌的培養基成分都為含10%的土豆泥、3%的豆粕粉的水溶液。培養溫度為步驟(1)所述各菌種的培養溫度,發酵罐轉速為150轉/分鐘,通氣量系數都為0.5,培養時間為27小時。 
(4)將滅菌后的甘油及發酵后待混合的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌、厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌菌液按比例混合即得。 
  
實施例:
將除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌和厚垣輪枝菌的原始菌種利用真菌培養基平板,球形芽孢桿菌的原始菌種利用細菌培養基斜面在實驗室活化培養1天,將活化后各菌種分別在與各自的活化培養基成分相同的液體培養基中搖瓶培養2天,然后將搖瓶培養好的菌種分別在500L的發酵罐中以相同都是10%濃度土豆泥和3%豆粕粉的培養基培養27小時,最后將500L發酵罐培養好的除蟲鏈霉菌、淡紫擬青霉菌和厚垣輪枝菌和球形芽孢桿菌以及滅菌好的甘油按30%、15%、25%、10%和20%的比例混合即的。
實驗例: 2012年3月中旬在湖北省通城縣大坪鄉和湖南省懷化市安江鎮分別進行了該抑制根結線蟲的微生物制劑的試驗工作。示范面積130畝,示范過程中土壤條件、水肥及各項管理水平一致。示范田地均為多年種植芹菜大棚,根結線蟲病害嚴重。該地塊每年都被精心耕種、精心管護、投入大量資金購買化肥、農藥用于增加土地肥力和滅治病蟲害,但隨著種植時間的增長根結線蟲越來越厲害,近幾年出現大面積減產40%以上。在今年用此發明后,菜地發生了驚人的變化:相對沒用發明產品的地塊根結線蟲明顯抑制,芹菜毛細根發達,產量在原來基礎上提高了50%以上。(如圖1左邊為沒用該產品的芹菜根系長滿根結線蟲,毛細根少;右邊為使用該發明的芹菜根系,基本沒有線蟲,根系發達,毛細根多。)

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一種 抑制 線蟲 微生物 制劑 及其 制備 方法 應用
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