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一種用于改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑.pdf

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一種 用于 改善 肥胖 降低 血脂 復合 益生菌 制劑
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摘要
申請專利號:

CN201711081761.4

申請日:

20171107

公開號:

CN107684567A

公開日:

20180213

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A61K35/747,A61K35/745,A61K35/744,A61P3/04,A61P3/06 主分類號: A61K35/747,A61K35/745,A61K35/744,A61P3/04,A61P3/06
申請人: 大連醫科大學
發明人: 郭艷杰,袁杰力,陳亮,關懷
地址: 116000 遼寧省大連市旅順口區旅順南路西段9號
優先權: CN201711081761A
專利代理機構: 大連東方專利代理有限責任公司 代理人: 劉慧娟;李馨
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201711081761.4

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種用于改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑,是由以下益生菌按比例混合而成短雙歧桿菌(Bifidobacterium?breve):嗜酸乳桿菌(Lactobacillus?acidophilus):干酪乳桿菌(Lactobacillus?casei):嗜熱鏈球菌(Sterptococcus?Thermophilus)的活菌菌數比例為0.5?1.5:0.5?1.5:0.5?1.5:0.5?1.5;所述復合益生菌制劑總活菌數量為至少20億/mL,所述復合益生菌制劑可以在妊娠期及哺乳期給予肥胖母親服用,以改善子代菌群紊亂及血脂水平,其對子代的菌群及血脂改善作用可持續到成年期。

權利要求書

1.一種用于改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑,其特征在于:由以下益生菌按比例混合而成短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve):嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus):干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei):嗜熱鏈球菌(SterptococcusThermophilus)的活菌菌數比例為0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5。2.根據權利要求1所述的一種用于改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑,其特征在于:所述復合益生菌制劑總活菌數量為至少20億/mL。3.權利要求1所述的復合益生菌制劑的應用,其特征在于:所述應用為在妊娠期及哺乳期給予肥胖母親服用權利要求1所述的復合益生菌制劑,以改善子代菌群紊亂及血脂水平。4.權利要求1所述的復合益生菌制劑的應用,其特征在于:所述應用為在妊娠期及哺乳期給予肥胖母親服用權利要求1所述的復合益生菌制劑,其對子代的菌群及血脂改善作用可持續到成年期。

說明書

技術領域

本發明涉及一種復合益生菌制劑,特別是一種用于改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑。

背景技術

妊娠期的肥胖是影響母嬰健康的公共衛生問題。妊娠期的肥胖導致圍產期的并發癥如高血壓、高血脂、高血糖等的發病率升高;同時母親的肥胖是導致肥胖特質在代際間傳遞的關鍵因素。妊娠期母親的肥胖也是預測子代肥胖的最佳預測指標。而兒童期肥胖的個體更容易發展為成年期的肥胖,影響遠期的健康水平。因此,超重及肥胖的孕婦不僅影響自身的健康同時對子代的健康構成遠期影響。目前世界范圍內針對肥胖的改善手段非常有限。

腸道菌群作為人體被遺忘的器官,參與機體的免疫、代謝、發育等正常的生理功能。近年來關于腸道菌群與肥胖的關系成為國際研究的熱點。尤其是厚壁菌門與擬桿菌門的比例變化可能是肥胖發生的始動及持續因素。肥胖孕婦其存在腸道菌群失衡,肥胖孕婦所產子代出現肥胖的比例升高,目前缺少切斷肥胖母親對子代代謝不利影響的有效手段。

發明內容

本發明提出了一種能夠有效改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑。

本發明的技術解決方案是:一種用于改善便秘的復合益生菌制劑,其特征在于:所述的復合益生菌制劑由以下益生菌按照一定的活菌數量混合而成:短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve):嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus):干酪乳桿菌(Lactobacillus casei):嗜熱鏈球菌(Sterptococcus Thermophilus)的比例為0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5;更為優選的比例為0.5-1:0.5-1:0.5-1:0.5-1;優選的比例為1:1:1:1,且混合后的復合益生菌制劑總活菌數量為至少20億/mL,以這樣一個比例用于動物實驗。這是一種能夠改善肥胖和降低血脂的復合益生菌制劑。

上文所述的短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、嗜熱鏈球菌(Sterptococcus Thermophilus)菌種都可以從現有的菌種庫中購買獲得,菌種號如下:短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)15700TM*、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)314TM、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)393TM*、嗜熱鏈球菌(Sterptococcus Thermophilus)19258TM。

本發明主要是利用現有的益生菌進行有機組合,其復合菌劑給予肥胖母體于妊娠期、哺乳期應用,研究表明其對肥胖母體及子代菌群紊亂、血脂代謝紊亂的改善作用,且其對子代的菌群及血脂改善作用可持續到成年期。

附圖說明

圖1母鼠體重的變化曲線圖:control為對照組母鼠,HFD為高脂飲食肥胖組母鼠,Probiotics為復合益生菌干預高脂飲食組母鼠。

圖2子鼠體重的變化曲線圖:control為對照組子鼠,HFD為高脂飲食肥胖組子鼠,probiotics為復合益生菌干預組子鼠。

圖3母鼠菌群16Sr DNA測序結果。M-C為對照組母鼠,M-HFD為肥胖組母鼠,M-P為復合益生菌干預組母鼠。

圖4子鼠菌群16Sr DNA測序結果。WF-C為正常對照組雌性斷乳期子鼠,WF-HFD為肥胖組雌性斷乳期子鼠,WF-P為復合益生菌干預組雌性斷乳期子鼠,WM-C為正常對照組雄性斷乳期子鼠,WM-HFD為肥胖組雄性斷乳期子鼠,WM-P為復合益生菌干預組雄性斷乳期子鼠;AF-C為正常對照組雌性成年期子鼠,AF-HFD為肥胖組雌性成年期子鼠,AF-P為復合益生菌干預組雌性成年期子鼠,AM-C為正常對照組雄性成年期子鼠,AM-HFD為肥胖組雄性成年期子鼠,AM-P為復合益生菌干預組雄性成年期子鼠。

具體實施方式

下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明,但不以任何方式限制本發明。

實施例1

對妊娠期肥胖動物模型的研究

取上述短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、嗜熱鏈球菌(Sterptococcus Thermophilus)分別培養,收集菌體后使用生理鹽水配制成混合菌懸液。選用SPF級C57BL/6J大鼠隨機分為3組,分別為空白對照組,肥胖模型組,益生菌干預組,分別給予標準飼料(70%碳水化合物,20%蛋白質,10%脂肪)、高脂飼料(35%碳水化合物,20%蛋白質,45%脂肪)、高脂飼料同時每天給予益生菌(20億)灌胃,飼養6周,6周后雌雄合籠,妊娠期及哺乳期分別為21天,子鼠母乳喂養21天后,全部給予標準飼料。檢測母鼠妊娠第1天、子鼠21天及42天菌群的變化,分析母鼠及子鼠的體重及血脂變化。

各組小鼠體重變化情況

見圖1,母鼠體重的結果顯示肥胖模型組母鼠的體重明顯高于對照組,復合益生菌合劑干預組母鼠體重明顯低于肥胖模型組。子鼠體重的結果見圖2,肥胖組子鼠體重明顯高于對照組,復合益生菌合劑干預組子鼠體重明顯低于肥胖組子鼠體重。

各組小鼠腸道菌群的變化

見表1,母鼠妊娠第1天腸道菌群變化的結果顯示,高脂飲食導致母鼠腸道菌群α-多樣性中的Chao1及Shannon指數高于正常組,復合益生菌合劑干預能夠降低高脂飲食誘導的母鼠腸道菌群的α-多樣性。

表1

Groups Chao1 Ace Shannon indices Simpson indices M-C 788.1±40.9 780.2±39.8 5.4±0.29 0.91±0.02 M-HFD 821.3±25.1* 796.9±24.5 6.2±0.21* 0.95±0.02* M-P 689.6±30.7# 682.6±28.1# 5.2±0.31# 0.92±0.01# WF-C 732.4±14.3 874.8±50.8 6.36±0.097 0.97±0.005 WF-HFD 593.2±114.6* 762.1±180.1 5.56±0.48* 0.94±0.016* WF--P 799.4±75.8# 1022.5±80.8# 6.5±0.29# 0.97±0.007# WM-C 1219.5±36.7 1211.8±34.7 6.72±0.17 0.97±0.005 WM-HFD 1106.6±43.6 1108.9±46.4 6.12±0.44 0.94±0.027 WM-P 1207.6±34.9 1190.6±25.7 6.42±0.12 0.96±0.006 AF-C 956.8±72.8 944.6±65.1 6.05±0.35 0.95±0.02 AF-HFD 904.3±33.4 909.6±34.6 6.01±0.42 0.94±0.03 AF-P 472.4±51.7*# 473.7±45.3*# 4.29±0.39*# 0.89±0.02*# AM-C 912.6±68.6 906.7±65.1 6.09±0.14 0.95±0.006 AM-HFD 958.7±47.3* 947.2±39.2* 6.38±0.17 0.97±0.004 AM-P 864.5±55.7# 848.8±49.3# 5.94±0.20# 0.95±0.008

*p<0.05與對照組相比,#p<0.05與肥胖組相比

圖1,針對母鼠腸道菌群門水平的分析結果顯示各組間在門水平的差異不顯著,然而在屬水平:Bacteroidetes S24-7,Allobaculum及Sutterella在肥胖組的相對含量較正常組明顯降低,復合益生菌合劑干預能夠增加Bacteroidetes S24-7,Allobaculum及Sutterella的相對含量。此外肥胖組母鼠Lachnospiraceae,Bacteroides,Prevotella,Mucispirillum,Helicobacter,Rikenellaceae及Ruminococcaceae的含量高于正常對照組,復合益生菌合劑干預能夠降低這些菌的含量。

針對子鼠21天(斷乳期)及42天(成年期)腸道菌群檢測的結果見表1,子鼠雌性21天腸道菌群的α-多樣性中的Chao1及Shannon指數低于正常組,復合益生菌干預組雌性子鼠的α-多樣性高于肥胖鼠子鼠。

表1小鼠菌群多樣性分析。M-C為對照組母鼠,M-HFD為肥胖組母鼠,M-P為復合益生菌干預組母鼠。WF-C為正常對照組雌性斷乳期子鼠,WF-HFD為肥胖組雌性斷乳期子鼠,WF-P為復合益生菌干預組雌性斷乳期子鼠,WM-C為正常對照組雄性斷乳期子鼠,WM-HFD為肥胖組雄性斷乳期子鼠,WM-P為復合益生菌干預組雄性斷乳期子鼠;AF-C為正常對照組雌性成年期子鼠,AF-HFD為肥胖組雌性成年期子鼠,AF-P為復合益生菌干預組雌性成年期子鼠,AM-C為正常對照組雄性成年期子鼠,AM-HFD為肥胖組雄性成年期子鼠,AM-P為復合益生菌干預組雄性成年期子鼠。

圖2針對子鼠腸道菌群門水平的分析結果顯示,與正常對照組子鼠相比,肥胖組雌性子鼠斷乳期厚壁菌門升高擬桿菌門降低,復合益生菌干預組雌性子鼠在門水平與正常對照組差異不顯著。在屬水平,與正常對照雌性斷乳期子鼠相比,肥胖組雌性子鼠斷乳期S24-7,Prevotella,Rikenellaceae及Ruminococcaceae相對含量降低,Bacteroides及Parabacteroides的相對含量升高。復合益生菌干預復合益生菌干預組雌性子鼠的腸道菌群與正常組差異不顯著。子鼠雄性21天腸道菌群在門水平分析結果顯示:與正常對照組雄性相比,肥胖組雄性子鼠斷乳期擬桿菌門升高,厚壁菌門降低。復合益生菌干預組雄性子鼠斷乳期與正常對照組差異不顯著。在屬水平,肥胖組子鼠雄性斷乳期S24-7,Lachnospiraceae及Bacteroides的相對含量高于對照組,而Lactobacillus,Allobaculum,Prevotella及Sutterella的相對含量低于對照組。復合益生菌干預有利于改善斷乳期雄性子鼠的菌群紊亂。雌性子鼠42天的腸道菌群分析結果顯示,在門水平肥胖組雌性成年期子代與正常組差異不顯著,而復合益生菌干預組成年期雌性子代的厚壁菌門高于肥胖組子代。在屬水平,與肥胖組及正常對照組相比,復合益生菌干預組有較高水平的Bacteroidaceae,Lachnospiraceae及Sutterella,較低水平的Lactobacillus,Prevotella,Helicobacter,Rikenellaceae及Parabacteroides。雄性子鼠42天腸道菌群的結果顯示:在門水平,與對照組相比,肥胖組雄性子鼠成年期厚壁菌門增加,擬桿菌門降低。在屬水平,與正常對照組相比,肥胖組雄性子鼠成年期Bacteroides,Helicobacter,Ruminococcus及Mucispirillum含量升高,S24-7含量降低。復合益生菌干預部分逆轉雄性子鼠成年期的菌群紊亂。

各組小鼠血脂的變化見表2:

表2

*p<0.05與對照組相比,#p<0.05與肥胖組相比

表2小鼠血脂分析。M-C為對照組母鼠,M-HFD為肥胖組母鼠,M-P為復合益生菌干預組母鼠。WF-C為正常對照組雌性斷乳期子鼠,WF-HFD為肥胖組雌性斷乳期子鼠,WF-P為復合益生菌干預組雌性斷乳期子鼠,WM-C為正常對照組雄性斷乳期子鼠,WM-HFD為肥胖組雄性斷乳期子鼠,WM-P為復合益生菌干預組雄性斷乳期子鼠;AF-C為正常對照組雌性成年期子鼠,AF-HFD為肥胖組雌性成年期子鼠,AF-P為復合益生菌干預組雌性成年期子鼠,AM-C為正常對照組雄性成年期子鼠,AM-HFD為肥胖組雄性成年期子鼠,AM-P為復合益生菌干預組雄性成年期子鼠。TC為總膽固醇含量,TG為甘油三脂含量,HDL為高密度脂蛋白含量,LDL為低密度脂蛋白含量。

肥胖組母鼠血清總膽固醇的含量升高,復合益生菌干預能夠降低高脂飲食母鼠的血清總膽固醇。肥胖組子鼠在斷乳期及成年期血清總膽固醇的含量明顯高于對照組,復合益生菌干預能夠降低高脂飲食母鼠子代血清總膽固醇的含量。

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