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南天竹火焰的組培方法.pdf

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南天竹 火焰 方法
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摘要
申請專利號:

CN201010195249.4

申請日:

20100608

公開號:

CN102273403A

公開日:

20111214

當前法律狀態:

有效性:

有效

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 上海上房園藝有限公司
發明人: 陳建華,黃建榮,沈勤
地址: 201114 上海市閔行區浦江鎮浦江村
優先權: CN201010195249A
專利代理機構: 上海科盛知識產權代理有限公司 代理人: 林君如
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201010195249.4

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及南天竹火焰的組培方法,該方法以南天竹火焰新萌發的小芽為基礎,步驟包括無菌材料的獲得、芽的分化和增殖、不定芽壯苗培養、生根培養及煉苗與移栽,最終得到性狀完好的南天竹火焰植株。與現有技術相比,本發明的移栽成活率可高達95%,大大提高繁殖速度和苗木的整齊度,更好地保持原有的母本性狀。

權利要求書

1.南天竹火焰的組培方法,其特征在于,該方法通過對摘取的南天竹火焰新萌發的小芽進行無菌處理后,再依次接種于小芽誘導培養基、不定芽增殖培養基、壯苗培養基及生根培養基中進行培養并置于溫室中煉苗后,即可移栽室外,得到南天竹‘火焰’植株。2.根據權利要求1所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,該方法具體包括以下步驟:(1)無菌材料的獲得摘取南天竹火焰新萌發的小芽,用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上,用75wt%的乙醇浸泡20-40s及1wt‰升汞溶液浸泡10-20min后,利用無菌水沖洗5-6次并吸干表面水分,取小芽基部并切成1cm接種于pH值為5.5-6.0的小芽誘導培養基上,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行芽誘導培養;(2)芽的分化和增殖小芽接種于小芽誘導培養基上4周后,小芽開始膨大,出現黃綠色突起,2周后可見明顯的愈傷組織,繼續培養培養1個月,切下帶芽愈傷組織接種于pH值為5.5-6.0的不定芽增殖培養基上,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行增殖培養;(3)不定芽壯苗培養在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于pH值為5.5-6.0的壯苗培養基中,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行壯苗培養,不定芽迅速伸長,30天后可以長到2-3cm;(4)生根培養取高度為2-3cm的小植株,將其接種于pH值為5.5-6.0的生根培養基中,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行生根培養,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,30天后可以長至4-6cm;(5)煉苗與移栽繼續生根培養30-50天,根系長至1-2cm時,選擇根系發達生長健壯的無菌苗,室內開瓶煉苗7天,取出后洗凈根部瓊脂,在溫室中馴化40天后,即可移栽室外,給予肥水管理,即可獲得產品植株。3.根據權利要求1所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述的小芽誘導培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為MS+6-BA1.0~5.0mg/L+NAA0.1~0.5mg/L+IBA1.0~5.0mg/L。4.根據權利要求3所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述小芽誘導培養基的營養成分優選MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L。5.根據權利要求1所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述的不定芽增殖培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為1/2MS+6-BA1.0~3.0mg/L+NAA0.1~0.3mg/L+IBA0.1~0.5mg/L。6.根據權利要求5所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述不定芽增殖培養基的營養成分優選1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.3mg/L。7.根據權利要求1所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述的壯苗培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為MS+6-BA0.5~2.0mg/L+NAA0.1~0.2mg/L+IBA0.3~0.5mg/L。8.根據權利要求7所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述壯苗培養基的營養成分優選MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L。9.根據權利要求1所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述的生根培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為1/2MS+NAA0.1~1.0mg/L+IBA3.0~8.0mg/L。10.根據權利要求9所述的南天竹火焰的組培方法,其特征在于,所述生根培養基的營養成分優選1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L。

說明書

技術領域

本發明涉及一種植株的組織培養方法,尤其是涉及南天竹‘火焰’的組織培養方法。

背景技術

南天竹火焰為常綠小灌木,喜溫暖多濕及通風良好的半陰環境。耐寒,耐旱,能耐微堿性土壤,適宜含腐殖質的沙壤土生長。南天竹火焰株型緊湊,葉較普通南天竹較寬,強光下葉鮮紅色,尤其是隆冬季節,葉色十分鮮艷。園林中多叢植或孤植于花境、庭院,又可做疏林地被植物,是良好的花鏡與庭院材料,市場需求量大。但是,該植物為國外引進的品種引種,組培報道尚未見,因此數量較少,其扦插、分株較慢,扦插成活率低,導致種苗供應受限制。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種移栽成活率可高達95%、保持母體現狀的南天竹‘火焰’的組織培養方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現:

南天竹火焰的組培方法,其特征在于,該方法通過對摘取的南天竹火焰新萌發的小芽進行無菌處理后,再依次接種于小芽誘導培養基、不定芽增殖培養基、壯苗培養基及生根培養基中進行培養并置于溫室中煉苗后,即可移栽室外,得到南天竹‘火焰’植株。

該方法具體包括以下步驟:

(1)無菌材料的獲得

摘取南天竹火焰新萌發的小芽,用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上,用75wt%的乙醇浸泡20-40s及1wt‰升汞溶液浸泡10-20min后,利用無菌水沖洗5-6次并吸干表面水分,取小芽基部并切成1cm接種于pH值為5.5-6.0的小芽誘導培養基上,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行芽誘導培養;

(2)芽的分化和增殖

小芽接種于小芽誘導培養基上4周后,小芽開始膨大,出現黃綠色突起,2周后可見明顯的愈傷組織,繼續培養培養1個月,切下帶芽愈傷組織接種于pH值為5.5-6.0的不定芽增殖培養基上,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行增殖培養;

(3)不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于pH值為5.5-6.0的壯苗培養基中,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行壯苗培養,不定芽迅速伸長,30天后可以長到2-3cm;

(4)生根培養

取高度為2-3cm的小植株,將其接種于pH值為5.5-6.0的生根培養基中,控制培養溫度為24-26℃,光照為70-90μmol/ms,進行生根培養,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,30天后可以長至4-6cm;

(5)煉苗與移栽

繼續生根培養30-50天,根系長至1-2cm時,選擇根系發達生長健壯的無菌苗,室內開瓶煉苗7天,取出后洗凈根部瓊脂,在溫室中馴化40天后,即可移栽室外,給予肥水管理,即可獲得產品植株。

所述的小芽誘導培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為MS+6-BA?1.0~5.0mg/L+NAA0.1~0.5mg/L+IBA1.0~5.0mg/L。

所述小芽誘導培養基的營養成分優選MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L。

所述的不定芽增殖培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為1/2MS+6-BA1.0~3.0mg/L+NAA0.1~0.3mg/L+IBA0.1~0.5mg/L。

所述不定芽增殖培養基的營養成分優選1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+IBA?0.3mg/L。

所述的壯苗培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為MS+6-BA0.5~2.0mg/L+NAA0.1~0.2mg/L+IBA0.3~0.5mg/L。

所述壯苗培養基的營養成分優選MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L。

所述的生根培養基的基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,營養成分為1/2MS+NAA?0.1~1.0mg/L+IBA3.0~8.0mg/L。

所述生根培養基的營養成分優選1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L。

與現有技術相比,本發明的移栽成活率可高達95%,大大提高繁殖速度和苗木的整齊度,更好地保持原有的母本性狀。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

實施例1

南天竹‘火焰’的組織培養方法,該方法包括以下步驟:

(1)無菌材料的獲得

摘取南天竹火焰新萌發的小芽,用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上,用75wt%的乙醇浸泡20s及1wt‰升汞溶液浸泡10min后,利用無菌水沖洗5-6次并吸干表面水分,取小芽基部并切成1cm接種于小芽誘導培養基,該小芽誘導培養基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+IBA1.0mg/L;

(2)芽的分化和增殖

小芽接種于小芽誘導培養基上4周后,小芽開始膨大,出現黃綠色突起,2周后可見明顯的愈傷組織,基部愈傷組織上小芽比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現象,在該培養中生長發育良好,繼續培養培養1個月,切下帶芽愈傷組織接種于不定芽增殖培養基上,該不定芽增殖培養基的成分為1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L;

(3)不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于壯苗培養基中,不定芽迅速伸長,30天后可以長到2cm,該壯苗培養基的成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+IBA?0.3mg/L;

(4)生根培養

取高度為2cm的小植株,將其接種于生根培養基中,該生根培養基的成分為1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA3.0mg/L,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,30天后可以長至4cm;

(5)煉苗與移栽

繼續生根培養30天,根系長至1cm時,選擇根系發達生長健壯的無菌苗,室內開瓶煉苗7天,取出后洗凈根部瓊脂,在溫室中馴化40天后,即可移栽室外,給予肥水管理,即可獲得產品植株。

上述的所有培養基的成分還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,該培養基的培養溫度為24℃,光照為70μmol/ms,pH值為5.5。

實施例2

南天竹‘火焰’的組織培養方法,該方法包括以下步驟:

(1)無菌材料的獲得

摘取南天竹火焰新萌發的小芽,用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上,用75wt%的乙醇浸泡40s及1wt‰升汞溶液浸泡20min后,利用無菌水沖洗6次并吸干表面水分,取小芽基部并切成1cm接種于小芽誘導培養基,該小芽誘導培養基的成分為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+IBA3.0mg/L;

(2)芽的分化和增殖

小芽接種于小芽誘導培養基上4周后,小芽開始膨大,出現黃綠色突起,2周后可見明顯的愈傷組織,基部愈傷組織上小芽比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現象,在該培養中生長發育良好,繼續培養培養1個月,切下帶芽愈傷組織接種于不定芽增殖培養基上,該不定芽增殖培養基的成分為1/2MS+6-BA?3.0mg/L+NAA0.3mg/L+IBA0.5mg/L;

(3)不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于壯苗培養基中,不定芽迅速伸長,30天后可以長到3cm,該壯苗培養基的成分為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L;

(4)生根培養

取高度為3cm的小植株,將其接種于生根培養基中,該生根培養基的成分為1/2MS+NAA1.0mg/L+IBA8.0mg/L,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,30天后可以長至6cm;

(5)煉苗與移栽

繼續生根培養50天,根系長至2cm時,選擇根系發達生長健壯的無菌苗,室內開瓶煉苗7天,取出后洗凈根部瓊脂,在溫室中馴化40天后,即可移栽室外,給予肥水管理,即可獲得產品植株。

上述的所有培養基的成分還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,該培養基的培養溫度為26℃,光照為90μmol/ms,pH值為6.0。

實施例3

南天竹‘火焰’的組織培養方法,該方法包括以下步驟:

(1)無菌材料的獲得

摘取南天竹火焰新萌發的小芽,用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上,用75wt%的乙醇浸泡30s及1wt‰升汞溶液浸泡15min后,利用無菌水沖洗5次并吸干表面水分,取小芽基部并切成1cm接種于小芽誘導培養基,該小芽誘導培養基的成分為MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L;

(2)芽的分化和增殖

小芽接種于小芽誘導培養基上4周后,小芽開始膨大,出現黃綠色突起,2周后可見明顯的愈傷組織,繼基部愈傷組織上小芽比較多,但不影響不定芽的增殖,不定芽生長迅速并無玻璃化等不良現象,在該培養中生長發育良好,繼續培養培養1個月,切下帶芽愈傷組織接種于不定芽增殖培養基上,該不定芽增殖培養基的成分為1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+IBA?0.3mg/L;

(3)不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于壯苗培養基中,該壯苗培養基的成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L,不定芽迅速伸長,30天后可以長到3cm;

(4)生根培養

取高度為3cm的小植株,將其接種于生根培養基中,該生根培養基的成分為1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA5.0mg/L,10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基,30天后可以長至6cm;

(5)煉苗與移栽

繼續生根培養40天,根系長至2cm時,選擇根系發達生長健壯的無菌苗,室內開瓶煉苗7天,取出后洗凈根部瓊脂,在溫室中馴化40天后,即可移栽室外,給予肥水管理,即可獲得產品植株。

上述的所有培養基的成分還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L,該培養基的培養溫度為25℃,光照為80μmol/ms,pH值為5.8。

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