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一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基及其使用方法.pdf

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一種 同時 用于 大花蕙蘭莖尖 叢生 誘導 增殖 培養基 及其 使用方法
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摘要
申請專利號:

CN201110204007.1

申請日:

20110721

公開號:

CN102283127A

公開日:

20111221

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 福建省亞熱帶植物研究所
發明人: 許傳俊,黃珺梅,曾碧玉,許文江
地址: 361000 福建省廈門市嘉禾路780-800號
優先權: CN201110204007A
專利代理機構: 廈門原創專利事務所 代理人: 陳建華
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201110204007.1

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明所述一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基及其使用方法,該培養基的組分用量為,MS基本培養基中大量元素含量減半,1L;6-芐基嘌呤,2mg/L;萘乙酸,0.3mg/L;蔗糖,20mg/L;瓊脂,8g/L;pH5.8。其使用方法為:1)在解剖鏡下剝取大花蕙蘭莖尖,接種在上述誘導和增殖培養基上,誘導出叢生芽;2)將誘導的叢生芽接種在上述誘導和增殖培養基上繼續增殖擴繁;3)將誘導的叢生芽小芽切下,接種在生根培養基上生根;4)將生根小苗煉苗后移栽。該培養基誘導大花蕙蘭叢生芽效率高,變異率低,有利于保持種苗的優良品質。采用本方法培養大花蕙蘭,從誘導叢生芽到生根培養,不需要經過的原球莖階段,只用了兩種培養基就實現了常規四個階段的培養。

權利要求書

1.一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基,其特征是:該培養基的組份用量為,基本培養基中大量元素含量減半,1L;6-芐基嘌呤,2mg/L;萘乙酸,0.3mg/L;蔗糖,20mg/L;瓊脂,8g/L;Ph5.8。2.一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基的使用方法,其特征是:1)在解剖鏡下剝取大花蕙蘭莖尖,包括莖尖分生組織,還包括葉原基部分,可以大到帶有一片心葉,接種在上述誘導和增殖培養基上,誘導出叢生芽;2)將誘導的叢生芽接種在上述誘導和增殖培養基上繼續增殖擴繁;3)將誘導的叢生芽小芽切下,接種在生根培養基上生根;4)將生根小苗煉苗后移栽。

說明書

技術領域

????本發明涉及一種植物培養基,屬于大花蕙蘭組織培養技術,特別是一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基及其使用方法。

背景技術

大花蕙蘭(Cymbidium?glandiflorium),是蘭科蘭屬(?Cymbdiium)中的一部分大花附生種類及其雜交種。其花色艷麗、姿態優美、花期長,是目前我國花卉市場上流行的室內盆栽花卉之一。大花蕙蘭與大多數蘭花一樣,種子的胚發育不完全,幾乎沒有胚乳,種子的自然萌發率極低,在自然狀態下繁衍困難,傳統上靠分株繁殖,分株能力弱、增殖率極低、繁殖速度慢。由于長期無性繁殖,帶病毒的植株日益增多,品質下降,造成我國目前市售種苗主要依靠國外進口。采用組培技術生產高品質的試管苗是滿足種苗市場的一個有效途徑。

在大花蕙蘭快繁的現有技術中,對大花蕙蘭的離體培養主要通過誘導莖尖分生組織形成原球莖或愈傷組織再分化獲得試管苗,此方法雖然誘導效率高,但畸形苗率高,不利于產業化大規模生產。公開號為CN1586166(大花蕙蘭優質種苗快速繁殖方法)、CN101455178(一種新品種大花蕙蘭的培養方法)和CN1247022(大花蕙蘭離體快速繁殖方法)三種發明專利都是采用原球莖方法進行大花蕙蘭組織快繁。雖然劉麗鋒等(叢生芽——大花蕙蘭快速繁殖的新途徑[J];四川農業大學學報,2004(2))報導的方法通過一個莖尖分生組織誘導形成叢生芽,但多數莖尖分化一個芽,誘導效率低,莖尖在培養80天后增殖率就不再發生變化。采用大花蕙蘭莖尖或種子為外植體常規繁殖中,在誘導、繼代、育苗和生根四個階段使用不同的培養基,生產流程多,生產成本高。

發明內容

本發明的目的,在于針對現有技術的不足,提供一種能提高叢生芽誘導率并且同時可以用于增殖的培養基,通過該培養基和生根培養基即可實現常規需四種培養基四個階段的培養效果,生產的種苗品質好,簡化生產程序,提高效率,節約了成本。

本發明的這樣實現的,所述一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基,其特征是:該培養基的組分用量為,

基本培養基中大量元素含量減半,1L;

6-芐基嘌呤,2mg/L;

萘乙酸,0.3mg/L;

蔗糖,20mg/L;

瓊脂,8g/L;

Ph5.8。

本發明所述一種同時用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導和增殖的培養基的使用方法,其特征是:

1)在解剖鏡下剝取大花蕙蘭莖尖,包括莖尖分生組織,還包括葉原基部分,可以大到帶有一片心葉,接種在上述誘導和增殖培養基上,誘導出叢生芽;

2)將誘導的叢生芽接種在上述誘導和增殖培養基上繼續增殖擴繁;

3)將誘導的叢生芽小芽切下,接種在生根培養基(1/2MS+NAA?0.3mg/L)上生根;

4)將生根小苗煉苗后移栽。

本發明組培苗誘導及培養條件包括溫度、光照,上述步驟1至4培養溫度為24±2℃,光照1400lx;步驟3所用叢生芽小芽,其生長2cm以上的芽即可用于生根培養誘導。

上述組分中,基本培養基中大量元素含量減半,提供植物組織生長發育所需的無機營養元素和部分有機營養元素,6-芐基嘌呤和萘乙酸是植物生長調節劑,具有促進培養組織形成叢生芽的作用,蔗糖提供組織生長所用的碳素營養,瓊脂的主要作用是固化培養基,起支撐作用。將上述組分攪拌溶解均勻,pH調整為5.8左右即可。

本發明的有益效果是,采用本發明進行大花蕙蘭快繁,對剝取大花蕙蘭莖尖的大小要求較低,剝取的不只是莖尖分生組織,還包括葉原基部份,可以大到帶有一片心葉,降低了操作難度;采用本培養基對大花蕙蘭莖尖進行叢生芽的誘導和增殖,可以在將大于2cm左右的小苗進行生根誘導的同時,對其他較小的芽繼續在該培養基上進一步增殖培養;使用本培養基一個大花蕙蘭莖尖在80天最多可以誘導出20個以上叢生芽,誘導效率高,而且還可以在該培養基上繼續增殖;本試驗利用叢生芽途徑,從啟動培養到生根培養,不需要經過原球莖階段,只用了兩種培養基就實現了四個階段的培養,簡化了生產程序,節約成本,提高了效率,降低了由于經過原球莖誘導分化導致的變異率,保障種苗品質。

具體實施方式

本發明所述一種用于大花蕙蘭莖尖叢生芽誘導及增殖培養基及其使用方法,該培養基是將6-芐基嘌呤6-BA、萘乙酸NAA、蔗糖和瓊脂溶解于將基本培養基MS中大量元素含量減半的培養基中而成(稱1/2MS),其組分的用量為:

1/2MS?(MS大量元素含量減半)?1L,

6-BA,2mg/L;

NAA,0.3mg/L;

蔗糖20mg/L

瓊脂8g/L

pH5.8

上述成分中,1/2MS是基本培養基MS中大量元素含量減半,提供植物組織生長發育所需的無機營養元素和部分有機營養元素,6-BA和NAA是植物生長調節劑,具有促進培養組織形成叢生芽的作用,蔗糖提供組織生長所用的碳素營養,瓊脂的主要作用是固化培養基,起支撐作用。將上述組分攪拌溶解均勻,pH調整為5.8左右即可。

本發明用于大花蕙蘭的繁殖,它采用如下步驟:步驟一:在解剖鏡下剝取大花蕙蘭莖尖(莖尖大小不只是分生組織,還包括葉原基部分,可以大到帶有一片心葉),接種在本發明的誘導和增殖培養基上,誘導出叢生芽;步驟二:將誘導的叢生芽接種在本發明的誘導和增殖培養基繼續擴繁;步驟三:將誘導的叢生芽小芽切下,接種在生根培養基(1/2MS+NAA?0.3mg/L)上生根;步驟四:將生根小苗煉苗后移栽。組培苗誘導及培養條件包括溫度、光照,步驟一至四,培養溫度條件為24±2℃,光照1400lx。步驟三所用叢生芽小芽其生長2cm以上的芽即可用于生根培養誘導。如此只用兩種培養基(1、誘導和增殖培養基;2、生根培養基),就實現了四個階段的培養,簡化了生產程序,節約成本,提高了效率,

用本發明可以使大花蕙蘭莖尖誘導出叢生芽,誘導效率不低于90%,一個莖尖在培養80天最多可以誘導出20多個芽,顯著提高繁殖系數,易于工廠化生產大花蕙蘭組培苗。

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