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一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法及消炎成分的應用.pdf

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一種 馬齒莧 提取 消炎 成分 方法 應用
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摘要
申請專利號:

CN201710985071.5

申請日:

20171020

公開號:

CN107595903A

公開日:

20180119

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/185,A61P29/00,A61P31/04 主分類號: A61K36/185,A61P29/00,A61P31/04
申請人: 程志鵬
發明人: 程志鵬
地址: 541000 廣西壯族自治區桂林市疊彩區中山北路140號30棟2單元402室
優先權: CN201710985071A
專利代理機構: 南寧新途專利代理事務所(普通合伙) 代理人: 但玉梅
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201710985071.5

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明提供一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法及消炎成分的應用,屬于中草藥提取技術領域。該方法包括的步驟有:將馬齒莧全草干燥粉碎得馬齒莧粉末;將馬齒莧粉末用酸性乙醇超聲波提取得到乙醇提取液;將乙醇提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成溶液過大孔樹脂吸附,粗提物溶液過完后用水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5~6且乙腈∶正丁醇的體積比為1:6?8的混合液為洗脫劑,洗脫得到洗脫液;再經濃縮干燥得馬齒莧消炎成分。本發明從馬齒莧中成功提取到了抗菌消炎活性成份,這些活性成份的獲得對于馬齒莧在抗菌消炎方面的研究具有積極意義。

權利要求書

1.一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法,其特征在于包括以下步驟:(1)將馬齒莧全草去雜,干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為55~60%的乙醇水溶液中,以功率125~175W的超聲波在55~60℃下提取得到乙醇提取液;(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成9-12mg/ml的粗提物溶液,過大孔樹脂吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5~6且乙腈∶正丁醇的體積比為1:6-8的混合液為洗脫劑,以5~7BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述干燥是于40~50℃溫度下恒溫干燥。3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述乙醇的體積濃度為58%;乙醇水溶液與所述馬齒莧粉的液固比為5-8:1。4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.5-0.8%。5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述大孔樹脂為D101或H-103。6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)所述洗脫劑中,乙腈和正丁醇的體積比為1:7。7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)所述粗提物溶液,過大孔樹脂的速度為3.8-5.2BV/h。8.權利要求1-7中任一項所得消炎成分在制作抗菌消炎藥物中的應用。

說明書

【技術領域】

本發明涉及中草藥提取技術領域,具體涉及一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法及消炎成分的應用。

【背景技術】

隨著抗生素的廣泛應用,細菌的耐藥性逐年增加,成為臨床醫生難以對付的“超級細菌”。同時,抗生素本身具有的毒副作用,對人體和環境也造成威脅。天然藥物是從植物、動物和微生物等天然資源中開發出來的藥物,具有毒副作用小、耐藥性小等優勢。目前,在世界范圍內的藥品市場中,約30%來源于天然產品。從天然產物尤其是從藥用植物中尋找新穎的抗菌藥物受到國內外研究者的重視。

馬齒莧(學名:Portulaca oleracea L.)一年生草本植物,馬齒莧全草內含有殺菌消炎的成分,全草供藥用有清熱利濕、解毒消腫、消炎、止渴、利尿作用;從馬齒莧中提取消炎成分對抗菌藥物的研究具有積極的意義。然而,目前對馬齒莧進行提取的研究工作,大多集中在提取和應用其多糖成分,對其消炎成分進行的相關研究較少。公開號為103622133A的中國專利申請公開了一種馬齒莧提取物及其應用,將通過水提得到的提取物應用在殺菌防腐方面,然而其提取方法所得殺菌活性成份少,抑菌效果也不理想。

【發明內容】

本發明的發明目的在于:針對上述存在的問題,本發明的目的之一是提供一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法,該方法通過篩選提取方法和提取溶劑,能夠獲得馬齒莧中的消炎成分。本發明的另一個目的是提供上述消炎成分在抗菌藥物中的應用。

為了實現上述目的,本發明采用的技術方案如下:

一種從馬齒莧中提取消炎成分的方法,包括以下步驟:

(1)將馬齒莧全草去雜,干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為55~60%的乙醇水溶液中,以功率125~175W的超聲波在55~60℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成9-12mg/ml的粗提物溶液,過大孔樹脂吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5~6且乙腈∶正丁醇的體積比為1:6-8的混合液為洗脫劑,以5~7BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

本發明中,優選地,步驟(1)中所述干燥是于40~50℃溫度下恒溫干燥,低溫干燥有利于保護有效成分不被破壞。

本發明中,優選地,步驟(2)中所述乙醇的體積濃度為58%;乙醇水溶液與所述馬齒莧粉的液固比為5-8:1;控制乙醇體積濃度和料液比可以最大限度提高提取物得率。

本發明中,優選地,步驟(2)中所述的乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.5-0.8%。

本發明中,優選地,步驟(3)中所述大孔樹脂為D101或H-103。

本發明中,優選地,步驟(3)所述洗脫劑中,乙腈和正丁醇的體積比為1:7。

本發明中,優選地,步驟(3)所述粗提物溶液,過大孔樹脂的速度為3.8-5.2BV/h。

綜上所述,由于采用了上述技術方案,本發明的有益效果是:

1、本發明通過對馬齒莧進行超聲醇提后,在經過大孔樹脂吸附和純化等步驟,從馬齒莧中成功提取到了抗菌活性成份,這些活性成份的獲得對于馬齒莧在抗菌性方面的研究具有積極意義。

2、本發明在馬齒莧的提取過程中,通過使用酸性乙醇、控制乙醇的濃度和用量、通過采用水洗、大孔樹脂吸附、乙腈和正丁醇混合洗脫的步驟,并通過控制過大孔樹脂的速度可流量,優化提純工藝,更能有針對性地得到馬齒莧中的抗菌活性成份,得到的提取物抗菌活性較好。

【具體實施方式】

為了更清楚地表達本發明,以下通過具體實施例對本發明作進一步說明。

實施例1

(1)將馬齒莧全草去雜,于40~50℃溫度下恒溫干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為55%的乙醇水溶液中,控制乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.5%,控制乙醇水溶液與馬齒莧粉的液固比為5:1;以功率125W的超聲波在55℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成9mg/ml的粗提物溶液,以5.2BV/h的速度過大孔樹脂D101吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5且乙腈∶正丁醇的體積比為1:6的混合液為洗脫劑,以5BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

實施例2

(1)將馬齒莧全草去雜,于40~50℃溫度下恒溫干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為58%的乙醇水溶液中,控制乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.6%,控制乙醇水溶液與馬齒莧粉的液固比為6:1;以功率150W的超聲波在58℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成10mg/ml的粗提物溶液,以4BV/h的速度過大孔樹脂H-103吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5.5且乙腈∶正丁醇的體積比為1:7的混合液為洗脫劑,以6BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

實施例3

(1)將馬齒莧全草去雜,于40~50℃溫度下恒溫干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為60%的乙醇水溶液中,控制乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.8%,控制乙醇水溶液與馬齒莧粉的液固比為8:1;以功率175W的超聲波在60℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成12mg/ml的粗提物溶液,以3.8BV/h的速度過大孔樹脂D101吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用pH值為5且乙腈∶正丁醇的體積比為1:8的混合液為洗脫劑,以7BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

對比例1

將新鮮的馬齒莧原料在-20℃下冷凍24h,取冷凍的馬齒莧原料,用食物調理機打成細粉,稱量200g所述細末置于容器中,加入250ml純凈水,將混合物加熱煮沸以進行提取,提取25分鐘后,在6000rpm下離心分離30分鐘,得到上清液,上清液濃縮干燥得提取物。

對比例2

(1)將馬齒莧全草去雜,于40~50℃溫度下恒溫干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為58%的乙醇水溶液中,控制乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.6%,控制乙醇水溶液與馬齒莧粉的液固比為6:1;以功率150W的超聲波在58℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成10mg/ml的粗提物溶液,以4BV/h的速度過大孔樹脂H-103吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用體積濃度為75%的乙醇為洗脫劑,以6BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

對比例3

(1)將馬齒莧全草去雜,于40~50℃溫度下恒溫干燥至無水,再粉碎、過篩至50~60目,得馬齒莧粉末;

(2)將馬齒莧粉末置于含鹽酸的體積濃度為58%的乙醇水溶液中,控制乙醇水溶液所含的鹽酸的質量分數為0.6%,控制乙醇水溶液與馬齒莧粉的液固比為6:1;以功率150W的超聲波在58℃下提取得到乙醇提取液;

(3)將上述提取液減壓濃縮至無醇味,加水配制成10mg/ml的粗提物溶液,以4BV/h的速度過大孔樹脂H-103吸附,粗提物溶液過完后采用用量大于5BV的水清洗大孔樹脂,再采用正丁醇為洗脫劑,以6BV/h的洗脫速率洗脫得到洗脫液;

(4)將所述洗脫液濃縮后低溫冷凍干燥得馬齒莧消炎成分。

抑菌效果試驗

1、菌懸液的制備

在無菌操作臺中,挑取金黃色葡萄球菌、結核桿菌、肺炎球菌這3種標準菌株少許,接種于牛肉膏蛋白胨培養基中,放置于37℃恒溫水浴搖床中震蕩培養18h。取18h培養的各菌株培養物,用牛肉膏蛋白胨培養基稀釋1000倍得菌懸液用于實驗。

2、供試液的制備

將本發明所得各實施例和對比例中的抗菌活性物質經冷凍干燥,分別用二甲亞砜溶解,制備成1mg·mL-1的初始濃度,在超凈工作臺中用0.22μm(尼龍66)的微孔濾膜過濾備用

3、二倍稀釋法

對于每個受試樣品分別取滅菌試管8支,第1管加入供試液0.1mL,第2-8管中分別加入0.1mL培養基液,取供試液0.1mL加入第2管中,混勻后取0.1mL加入第3管中,依次稀釋至第7管,第7管吸出0.1mL棄去,第8管不加藥液作為對照。每管加入菌懸液0.9mL,使得1-8管的液體總量均為1mL,受試藥液濃度分別為:100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.56μg·mL-1。將試管放入恒溫培養箱37℃培養24h后,取出試管觀察細菌生長情況。如藥液管混濁,表示細菌生長,供試藥液無抑菌作用;如藥液管清亮則表示細菌生長受抑制,其能抑制細菌生長的最大稀釋度的藥液,即為該樣品的最小抑菌濃度(MIC)。

4、抑菌結果

各組提取物對3種細菌的抑菌活性測試結果見下表1。

表1抑菌測試結果

從上表可以看出,采用本發明的方法提取的馬齒莧中的提取物,對金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、結核桿菌有很好的抑制效果,且抑菌效果好于對比例組,說明本發明的提取方法更能有針對性地得到馬齒莧中的抗菌活性成份,所得提取物可以用于制作抗菌消炎藥物中。

上述說明是針對本發明較佳可行實施例的詳細說明,但實施例并非用以限定本發明的專利申請范圍,凡本發明所提示的技術精神下所完成的同等變化或修飾變更,均應屬于本發明所涵蓋專利范圍。

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