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一種益生元、益生菌復合微生態制劑及其制備方法.pdf

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一種 益生元 益生菌 復合 生態 制劑 及其 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201810412982.3

申請日:

20180503

公開號:

CN108606329A

公開日:

20181002

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A23L33/21,A23L33/135,C12N1/20,C12N1/16,C12R1/645,C12R1/125 主分類號: A23L33/21,A23L33/135,C12N1/20,C12N1/16,C12R1/645,C12R1/125
申請人: 吉林師范大學博達學院
發明人: 田木,王艷丹,趙琳琳,解慧,郝鑫,周曉梅,柴振宇
地址: 136000 吉林省四平市鐵西區海豐大街1301號
優先權: CN201810412982A
專利代理機構: 哈爾濱市邦杰專利代理事務所(普通合伙) 代理人: 孫淑榮
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201810412982.3

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明公開了一種益生元、益生菌復合微生態制劑及其制備方法,本申請的主要步驟為:通過選取乳酸菌,酵母菌和枯草芽孢桿菌為復合微生態制劑的菌種,其中乳酸菌和酵母菌來自于開菲爾粒,分別活化開菲爾粒和枯草芽孢桿菌,將開菲爾粒與枯草芽孢桿菌按照3:1比例混合,按發酵液體積的3~10%將益生菌混合菌種接種于培養基中,發酵培養,添加益生元,同時加入脫脂乳粉、海藻糖、谷氨酸鈉、甘油作為保護劑,混合均勻后進行低溫噴霧干燥制得微生態制劑。本發明的特點是微生態制劑中含有乳酸菌,酵母菌和枯草芽孢桿菌,可以共同調節機體微生態平衡,同時還含有益生元物質,可以更好地改善機體健康,提高機體免疫力。

權利要求書

1.一種益生元、益生菌復合微生態制劑,其特征在于:復合微生態制劑由益生元和益生菌組合而成,所述的益生菌由乳酸菌,酵母菌和枯草芽孢桿菌混合發酵而成,乳酸菌和酵母菌是由開菲爾粒復合菌株提供,制劑中活菌總數大于50億cfu/g,所述的益生元為猴頭菇多糖、姬松茸多糖和香菇多糖中的一種或幾種組成,添加量為0.3%~1.5%。2.根據權利要求1所述的益生元、益生菌復合微生態制劑的制備方法,其特征在于,制備的復合微生態制劑使用多種菌種混合發酵,高密度培養后,添加益生元物質,經過低溫噴霧干燥制得。3.根據權利要求2所述的益生元、益生菌復合微生態制劑的制備方法,其特征在于:將益生菌混合菌種按發酵液體積的3~10%接種于培養基,其中開菲爾粒與枯草芽孢桿菌的接種比例為3:1,28~36℃條件下,發酵16~24小時。

說明書

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域,涉及一種益生元、益生菌復合微生態制劑及其制備方法。

背景技術

二十世紀四十年代,為了促進動物快速生長,在飼料中添加抗生素,但是隨著抗生素長期廣泛的使用,會產生耐藥性,藥物殘留,動物機體免疫力下降等弊端。微生態制劑以其綠色,安全,無藥物殘留等優點逐漸取代了抗生素而被廣泛使用。與傳統的飼料添加劑相比,益生菌微生態制劑能夠有效抑制消化道中的致病菌與病原微生物的生長繁殖,并使益生菌在腸道中定植,調整動物腸道平衡,對動物疾病的防治具有一定的效果。目前,世界各國對微生態制劑的重視程度逐漸增加并大力推廣。益生元、益生菌復合微生態制劑是以微生態學作為理論依據,經過特殊加工工藝制成,含有活菌及其代謝產物,為改善動物體內微生態平衡而發揮益生作用,提高動物免疫力和健康水平的活菌制劑。

益生元一種膳食用的補充劑,通過選擇性的刺激一種或幾種益生菌的生長與活性,從而可以改善寄主健康而不被消化吸收的物質。常見的益生元有低聚果糖、菊粉、猴頭菇多糖、姬松茸多糖和香菇多糖等。益生元不能直接被機體利用發揮作用,而是通過益生菌共同發揮作用。機體消化道內沒有分解益生元的物質,因此其大部分益生元物質可通過機體小腸和胃而不被分解利用,直接進入大腸內被雙歧桿菌、乳酸菌等益生菌利用。

開菲爾發酵劑是由乳酸菌,酵母菌,醋酸菌等多種益生菌組成的菌株,其中的乳酸菌及其代謝產物對病原性微生物具有強烈的抑制作用,其中的酵母菌可以產生獨特的酒香味,因而開菲爾也被譽為發酵乳中香檳。是一種含有多菌株的發酵劑。

目前國內外市場的主要益生菌制劑是枯草芽孢桿菌制劑和乳酸菌制劑,多數為多種單一菌種制備而成,菌種構成比較單一。本發明將開菲爾發酵劑作為乳酸菌和酵母菌的來源,與枯草芽孢桿菌混合,經高密度混合培養發酵,添加猴頭菇多糖、姬松茸多糖和香菇多糖中的一種或幾種經過低溫噴霧干燥技術,制成益生元、益生菌復合微生態制劑。該微生態添加劑具有活菌總數高,可以調節機體的胃腸道平衡,促進機體生長,增強機體免疫力等功效。

發明內容

本發明的目的在于提供一種益生元、益生菌復合微生態制劑及其制備方法,制備的益生元、益生菌復合微生態制劑不僅含有改善宿主健康的益生元物質,同時還含有多種益生菌且活菌總數高,起到調節機體胃腸道平衡,增強機體免疫力的功效。

本發明是通過以下技術手段來實現的:一種益生元、益生菌復合微生態制劑,復合微生態制劑由益生元和益生菌組合而成,所述的益生菌由乳酸菌,酵母菌和枯草芽孢桿菌混合發酵而成,乳酸菌和酵母菌是由開菲爾粒復合菌株提供,制劑中活菌總數大于50億cfu/g,所述的益生元為猴頭菇多糖、姬松茸多糖和香菇多糖中的一種或幾種組成,添加量為0.3%~1.5%。

益生元、益生菌復合微生態制劑的制備方法:復合微生態制劑使用多種菌種混合發酵,高密度培養后,添加益生元物質,經過低溫噴霧干燥制得。將益生菌混合菌種按發酵液體積的3~10%接種于培養基,其中開菲爾粒與枯草芽孢桿菌的接種比例為3:1,28~36℃條件下,發酵16~24小時。

上述制劑中,所述的培養基,按重量百分比計,含有以下組分:濃縮乳清蛋白粉2~10%,葡萄糖1~10%,酵母粉0.5~1%,碳酸鈣0.4~1%,硫酸鎂0.01~0.05%,硫酸錳0.001~0.005%,,乳清粉1~10%。上述成分溶解于蒸餾水中,調節培養基pH為6.5~7.5,殺菌條件為85~115℃條件下保溫10~30min,冷卻至20~30℃。

上述制劑中,所述的混合發酵條件為:將益生菌混合菌種按發酵液體積的3~10%接種于培養基,其中開菲爾發酵劑與枯草芽孢桿菌的接種比例為3:1,28~36℃條件下,發酵16~24小時,添加0.3%-1.5%的益生元及保護劑經過噴霧干燥制得。

該益生元、益生菌復合微生態制劑具體制備方法包括如下步驟:

1)將枯草芽孢桿菌進行活化,并制備開菲爾發酵劑。

2)將益生菌混合菌種按發酵液體積的3~10%接種于高密度培養基中,其中開菲爾發酵劑與枯草芽孢桿菌的接種比例為:開菲爾發酵劑∶枯草芽孢桿菌=3:1,,接種于培養基中,在28~36℃條件下,發酵16~24小時。

3)發酵完成后,攪拌離心,在3000~6000r/min條件下,離心15~30min,收集濃縮菌體。

4)向濃縮菌體中加入0.3%-1.5%的益生元,同時加入脫脂乳粉10~20%、海藻糖1~10%、谷氨酸鈉1~10%、甘油1~5%作為保護劑,混合均勻后進行低溫噴霧干燥,控制進風溫度為80~120℃,出風溫度50~70℃,以保證制備的制劑中含有一定量的活菌總數。

本發明的有益效果在于:

1)本發明將開菲爾發酵劑和枯草芽孢桿菌進行混合培養發酵,制備的微生態制劑菌種多樣,活菌總數高達50億cfu/g以上;2)本發明的復合菌種經過混合培養發酵后添加對機體有益的益生元物質,從而更好地發揮調節機體胃腸道平衡,促進機體消化,增加機體體重,增強機體免疫力等功效。

具體實施方式

1)益生菌發酵劑的制備:

開菲爾發酵劑的制備:配置10%的脫脂乳溶液,經過85~95℃,10~30min殺菌后,冷卻至20~30℃,按照脫脂乳體積的0.1~0.5%添加開菲爾直投式發酵劑,在23~28℃的條件下發酵培養14~18h,保存在4℃條件下備用。

枯草芽孢桿菌的制備:將凍存的枯草芽孢桿菌進行劃線培養,分離出典型菌落接種于液體培養基在37℃條件下震蕩培養18h,經鏡檢符合枯草芽孢桿菌的標準形態,生長狀態良好,按接種量3~6%接種于液體培養基進行活化,37℃,震蕩培養18~24h,保存在4℃條件下備用。

2)混合發酵:

培養基的配置:向500mL蒸餾水中加入濃縮乳清蛋白10~20g,葡萄糖6~8g,酵母粉3~5g,碳酸鈣3~6g,硫酸鎂0.1~0.3g,硫酸錳0.01~0.03g,乳清粉10~15g,充分溶解后調節培養基pH為6.5~7.5,殺菌條件為85~115℃條件下保溫10~30min,冷卻至20~30℃備用。向冷卻后的培養基接種,按3~6%接種量,其中,開菲爾發酵劑:枯草芽孢桿菌=3:1,28~36℃,發酵培養18~24h。

3)復合微生態制劑的制備:

將制得的發酵液攪拌均勻,在4~10℃條件下,轉速3000~6000轉/分,時間15~30min離心處理,收集濃縮菌體;按菌體質量百分比計,添加0.3%-1.5%的益生元物質,脫脂乳粉10~15%、海藻糖1~5%、谷氨酸鈉1~5%、甘油1~3%,混合均勻,進行低溫噴霧干燥,控制進風溫度為80~120℃,出風溫度50~70℃,得到益生元、益生菌復合微生態制劑。

以下實施例是對本發明的進一步說明,而不是對本發明的限制。

實施例1:

1)益生菌發酵劑的制備

開菲爾發酵劑的制備:配置10%的脫脂乳溶液,經過85℃,30min殺菌后,冷卻至20℃,按照脫脂乳體積的0.1%添加開菲爾直投式發酵劑,在28℃的條件下發酵培養14h,保存在4℃條件下備用。

枯草芽孢桿菌的制備:將凍存的枯草芽孢桿菌進行劃線培養,分離出典型菌落接種于液體培養基在37℃條件下震蕩培養18h,經鏡檢符合枯草芽孢桿菌的標準形態,生長狀態良好,按接種量6%接種于液體培養基進行活化,37℃,震蕩培養18h,保存在4℃條件下備用。

2)混合發酵

培養基的配置:向500mL蒸餾水中加入濃縮乳清蛋白10g,葡萄糖8g,酵母粉5g,碳酸鈣3g,硫酸鎂0.3g,硫酸錳0.01g,乳清粉15g,充分溶解后調節培養基pH為6.5,殺菌條件為85℃條件下保溫30min,冷卻至20℃備用。向冷卻后的培養基接種,按3%接種量,其中,開菲爾發酵劑:枯草芽孢桿菌=3:1,28℃,發酵培養24h。

3)復合微生態制劑的制備

將制得的發酵液攪拌均勻,在4℃條件下,轉速3000轉/分,時間30min離心處理,收集濃縮菌體;按菌體質量百分比計,添加0.3%的益生元物質,脫脂乳粉15%、海藻糖1%、谷氨酸鈉5%、甘油1%,混合均勻,進行低溫噴霧干燥,控制進風溫度為80℃,出風溫度50℃,得到益生元、益生菌復合微生態制劑。

實施例2

1)益生菌發酵劑的制備

開菲爾發酵劑的制備:配置10%的脫脂乳溶液,經過90℃,20min殺菌后,冷卻至25℃,按照脫脂乳體積的0.3%添加開菲爾直投式發酵劑,在23℃的條件下發酵培養18h,保存在4℃條件下備用。

枯草芽孢桿菌的制備:將凍存的枯草芽孢桿菌進行劃線培養,分離出典型菌落接種于液體培養基在37℃條件下震蕩培養18h,經鏡檢符合枯草芽孢桿菌的標準形態,生長狀態良好,按接種量3%接種于液體培養基進行活化,37℃,震蕩培養24h,保存在4℃條件下備用。

2)混合發酵

培養基的配置:向500mL蒸餾水中加入濃縮乳清蛋白20g,葡萄糖6g,酵母粉3g,碳酸鈣6g,硫酸鎂0.2g,硫酸錳0.02g,乳清粉10g,充分溶解后調節培養基pH為7.5,殺菌條件為115℃條件下保溫10min,冷卻至30℃備用。向冷卻后的培養基接種,按6%接種量,其中,開菲爾發酵劑:枯草芽孢桿菌=3:1,36℃,發酵培養18h。

3)復合微生態制劑的制備

將制得的發酵液攪拌均勻,在8℃條件下,轉速4500轉/分,時間25min離心處理,收集濃縮菌體;按菌體質量百分比計,添加0.9%的益生元物質,脫脂乳粉12%、海藻糖3%、谷氨酸鈉1%、甘油2%,混合均勻,進行低溫噴霧干燥,控制進風溫度為120℃,出風溫度70℃,得到益生元、益生菌復合微生態制劑。

實施例3

1)益生菌發酵劑的制備

開菲爾發酵劑的制備:配置10%的脫脂乳溶液,經過95℃,10min殺菌后,冷卻至30℃,按照脫脂乳體積的0.5%添加開菲爾直投式發酵劑,在25℃的條件下發酵培養16h,保存在4℃條件下備用。

枯草芽孢桿菌的制備:將凍存的枯草芽孢桿菌進行劃線培養,分離出典型菌落接種于液體培養基在37℃條件下震蕩培養18h,經鏡檢符合枯草芽孢桿菌的標準形態,生長狀態良好,按接種量5%接種于液體培養基進行活化,37℃,震蕩培養20h,保存在4℃條件下備用。

2)混合發酵

培養基的配置:向500mL蒸餾水中加入濃縮乳清蛋白15g,葡萄糖7g,酵母粉4g,碳酸鈣4g,硫酸鎂0.1g,硫酸錳0.03g,乳清粉12g,充分溶解后調節培養基pH為7.0,殺菌條件為100℃條件下保溫20min,冷卻至25℃備用。向冷卻后的培養基接種,按4%接種量,其中,開菲爾發酵劑:枯草芽孢桿菌=3:1,32℃,發酵培養20h。

3)復合微生態制劑的制備

將制得的發酵液攪拌均勻,在10℃條件下,轉速6000轉/分,時間15min離心處理,收集濃縮菌體;按菌體質量百分比計,添加1.5%的益生元物質,脫脂乳粉10%、海藻糖5%、谷氨酸鈉3%、甘油3%,混合均勻,進行低溫噴霧干燥,控制進風溫度為100℃,出風溫度60℃,得到益生元、益生菌復合微生態制劑。

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