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一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法.pdf

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一種 提高 葡萄 試管 移栽 成活率 方法
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摘要
申請專利號:

CN201710295269.0

申請日:

20170428

公開號:

CN106937601A

公開日:

20170711

當前法律狀態:

有效性:

審查中

法律詳情:
IPC分類號: A01H4/00,A01G31/00,A01G17/02 主分類號: A01H4/00,A01G31/00,A01G17/02
申請人: 福建省農業科學院農業工程技術研究所
發明人: 賴呈純,范麗華,黃賢貴,潘紅,謝鴻根
地址: 350000 福建省福州市五四北路247號
優先權: CN201710295269A
專利代理機構: 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙) 代理人: 林曉琴
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201710295269.0

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法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明提供了一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法,包括以下步驟:(1)壯苗生根培養,(2)馴化煉苗,(3)試管苗預處理,(4)試管苗假植,(5)試管苗移栽。本發明所采用的方法簡單易行,可顯著提高葡萄試管苗的移栽成活率,移栽成活率可達93%以上,本發明不僅能夠快速獲得大量葡萄試管苗,且所獲得的葡萄試管苗具有高質量的優點,為工廠規模化繁育葡萄無病毒苗木奠定良好的基礎。

權利要求書

1.一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法,其特征在于:包括以下步驟:步驟(1)壯苗生根培養:將在壯苗培養上培養30~40天、高度5~6cm的葡萄試管苗,切去基部老化的組織,接種到生根培養基上生根培養25~30天,基部長成粗壯的根系,即可獲得壯苗生根后的葡萄試管苗;步驟(2)馴化煉苗:將步驟(1)獲得的葡萄試管苗,連培養瓶一起移出培養室,置于漫射光的大棚中,于自然溫度中放置5~7天,煉苗;后旋開培養瓶瓶蓋,每瓶加入20~30mL的無菌水,并將瓶蓋輕輕搭在瓶口上,繼續放置5~7天,進一步煉苗;后去掉瓶口瓶蓋,放置2~3天,即可獲得馴化煉苗后的葡萄試管苗;步驟(3)試管苗預處理:將步驟(2)所獲得的葡萄試管苗,從培養瓶中取出,去除培養基,并小心去掉根上附著的瓊脂,用清水沖洗干凈,后將葡萄試管苗放入0.2%多菌靈的溶液中浸泡10~15min,取出后陰干試管苗葉片水分,獲得預處理的葡萄試管苗;(4)試管苗假植:將步驟(3)所獲得的葡萄試管苗及時的移栽到裝有育苗基質的泡沫盒中,澆透水后泡沫盒用保鮮膜封口,并置于漫射光的大棚中培養,經過一系列的肥水管理,假植培養30~35天,葡萄試管苗成活,即可移栽;(5)試管苗移栽:將步驟(4)所獲得的假植后成活的葡萄試管苗,移栽到基質營養袋中培養,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。2.如權利要求1中所述的一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法,其特征在于:所述步驟(4)中,葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天后,泡沫盒的一角揭開保鮮膜一個小口,大小為2~3cm的等腰三角形;繼續培養5~7天后,保鮮膜可揭開1/3左右;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜1/2左右,并給盒中的葡萄試管苗補充適量的葉面肥;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜,并注意基質水分保持,以防葡萄試管苗失水,繼續培養7~10天,期間補充一次葉面肥,即可將葡萄試管苗移栽到基質營養袋中,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。

說明書

【技術領域】

本發明涉及植物組織培養技術領域,尤其涉及一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法。

【背景技術】

葡萄為葡萄科葡萄屬木質藤本植物,葡萄是世界最古老的果樹樹種之一,也是目前世界上栽培最廣泛的果樹之一。栽培上,葡萄主要采用枝條扦插、嫁接等無性繁殖為主。由于長期無性繁殖,造成葡萄苗木中積累病毒,導致葡萄原有的種性退化,產量和品質下降。若積累的病毒爆發,勢必給葡萄生產造成重大損失。為此,生產上利用植物組織培養的方法,培育葡萄的無病毒苗木,恢復其種性。然而,在葡萄組織培養過程中,葡萄試管苗的移栽成活率較低,本研究通過優化葡萄試管苗移栽的技術,以達到提高葡萄試管苗移栽成活率的目的,為工廠規模化生產葡萄無病毒苗木提供技術支撐。

【發明內容】

本發明所要解決的技術問題在于提供一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法。

本發明是這樣實現的:

一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法,包括以下步驟:

步驟(1)壯苗生根培養:

將在壯苗培養上培養30~40天、高度5~6cm的葡萄試管苗,切去基部老化的組織,接種到生根培養基上生根培養25~30天,基部長成粗壯的根系,即可獲得壯苗生根后的葡萄試管苗;

步驟(2)馴化煉苗:

將步驟(1)獲得的葡萄試管苗,連培養瓶一起移出培養室,置于漫射光的大棚中,于自然溫度中放置5~7天,煉苗;后旋開培養瓶瓶蓋,每瓶加入20~30mL的無菌水,并將瓶蓋輕輕搭在瓶口上,繼續放置5~7天,進一步煉苗;后去掉瓶口瓶蓋,放置2~3天,即可獲得馴化煉苗后的葡萄試管苗;

步驟(3)試管苗預處理:

將步驟(2)所獲得的葡萄試管苗,從培養瓶中取出,去除培養基,并小心去掉根上附著的瓊脂,用清水沖洗干凈,后將葡萄試管苗放入0.2%多菌靈的溶液中浸泡10~15min,取出后陰干試管苗葉片水分,獲得預處理的葡萄試管苗;

(4)試管苗假植:

將步驟(3)所獲得的葡萄試管苗及時的移栽到裝有育苗基質的泡沫盒中,澆透水后泡沫盒用保鮮膜封口,并置于漫射光的大棚中培養,經過一系列的肥水管理,假植培養30~35天,葡萄試管苗成活,即可移栽;

(5)試管苗移栽:

將步驟(4)所獲得的假植后成活的葡萄試管苗,移栽到基質營養袋中培養,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。

進一步地,所述步驟(4)中,葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天后,泡沫盒的一角揭開保鮮膜一個小口,大小為2~3cm的等腰三角形;繼續培養5~7天后,保鮮膜可揭開1/3左右;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜1/2左右,并給盒中的葡萄試管苗補充適量的葉面肥;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜,并注意基質水分保持,以防葡萄試管苗失水,繼續培養7~10天,期間補充一次葉面肥,即可將葡萄試管苗移栽到基質營養袋中,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。

本發明的有益效果在于:本發明的方法簡單易行,可顯著提高葡萄試管苗移栽成活率,移栽成活率在93%以上;本發明不僅能夠快速獲得大量葡萄無病毒試管苗,且所獲得的葡萄試管苗具有高質量的優點,是具有良好推廣前景的技術。

【具體實施方式】

一種提高葡萄試管苗移栽成活率的方法,包括如下步驟:

步驟1.葡萄試管苗的壯苗生根培養:將在壯苗培養上培養30~40天、高度5~6cm的葡萄試管苗,切去基部老化的組織,接種到生根培養基上生根培養25~30天,基部長成粗壯的根系,即可獲得壯苗生根后的葡萄試管苗。

步驟2.馴化煉苗:將步驟1所述的葡萄試管苗,連培養瓶一起移出培養室,置于漫射光的大棚中,于自然溫度中放置5~7天,煉苗;后旋開培養瓶瓶蓋,每瓶加入20~30mL的無菌水,并將瓶蓋輕輕扣在瓶口上,繼續放置5~7天,進一步煉苗;后去掉瓶口瓶蓋,放置2~3天,即可獲得馴化煉苗后的葡萄試管苗。

步驟3.試管苗預處理:將步驟2所獲得的葡萄試管苗,從培養瓶中取出,去除培養基,并小心去掉根上附著的瓊脂,用清水沖洗干凈,后將葡萄試管苗放入0.2%多菌靈的溶液中浸泡10~15min,取出后陰干試管苗葉片水分,獲得預處理的葡萄試管苗;

步驟4.試管苗假植:將步驟3所述的葡萄試管苗及時的移栽到裝有育苗基質的45cm×30cm泡沫盒中,澆透水后泡沫盒用保鮮膜封口,并置于漫射光的大棚中培養,經過一系列的肥水管理,假植培養30~35天,葡萄試管苗成活,即可移栽。試管苗假植具體的肥水管理管理方法:葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天左右后,泡沫盒的一角揭開保鮮膜一個小口,大小為2~3cm的等腰三角形;繼續培養5~7天后,保鮮膜可揭開1/3左右;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜1/2左右,并給盒中的葡萄試管苗補充適量的葉面肥;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜,并注意基質水分保持,以防葡萄試管苗失水,繼續培養7~10天,期間補充一次葉面肥,即可將葡萄試管苗移栽到基質營養袋中,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。其中葉面肥為市售育苗專用葉面肥。

步驟5.試管苗移栽:將步驟4所述的假植后成活的葡萄試管苗,移栽到基質營養袋中培養,以后按常規的育苗管理,可獲得健壯的葡萄苗。

下面詳細說明葡萄試管苗移栽過程的影響因素:

1、不同馴化煉苗方式對葡萄試管苗移栽成活率的影響

馴化煉苗方式1:根系生長良好的番茄試管苗連培養瓶一起移出培養室,于室內散射的自然光下繼續培養5天左右后,進行移栽。馴化煉苗方式2:根系生長良好的番茄試管苗連培養瓶一起移出培養室,于室內散射的自然光下繼續培養5天左右,然后旋松培養瓶瓶蓋,繼續放于5天左右后,進行移栽。馴化煉苗方式3:根系生長良好的番茄試管苗連培養瓶一起移出培養室,于室內散射的自然光下繼續培養5d左右,然后旋松培養瓶瓶蓋,加入適量無菌水20~30mL,并將瓶蓋輕輕扣在瓶口上,繼續放置5天左右后,進行移栽。同時設置一組對照:不經煉苗,將番茄試管苗從培養室里移除后,即進行移栽。試驗設3次重復。

將煉苗后的試管苗按步驟4的方法假植移栽后,培養35天后觀察和統計試管苗的成活情況,結果見表1。從表1可以看出,對照組,即不經任何煉苗處理的試管苗直接移栽,其成活率很低,只有32.5%;方式1處理組,即只將瓶苗移出培養室,自然光下放置5天左右的處理方式,其試管苗成活率為45.0%,極顯著高于對照組;方式2和方式3處理組,試管苗成活率極顯著高于方式1和對照組,成活率分別為85.3%和93.9%,在統計學上,方式2和方式3沒有明顯差異,但方式3成活率高于方式2,成活率可達93.9%。因此,葡萄試管苗馴化煉苗的方式以方式3為最佳,即根系生長良好的番茄試管苗連培養瓶一起移出培養室,于室內散射的自然光下繼續培養5天左右,然后旋松培養瓶瓶蓋,,加入適量無菌水20~30mL,并將瓶蓋輕輕扣在瓶口上,繼續放置5天左右后,進行移栽。

表1:不同馴化煉苗方式對番茄試管苗成活率的影響

注:表中不同字母表示鄧肯氏新復極差測驗差異顯著性,其中大寫字母為差異極顯著(P<0.01),小寫字母為差異顯著(P<0.05)。

2、不同假植肥水管理方法對葡萄試管苗移栽成活率的影響

將葡萄試管苗按照步驟2所述的方法進行馴化煉苗,經預處理后,進行移栽假植,每盒假植40株試管苗,澆透水后泡沫盒用保鮮膜封口,并置于漫射光的大棚中培養。肥水管理按以下4種方法進行,方法1:葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天左右后,揭去覆蓋的保鮮膜繼續培養,并在適當的時間補充葉面肥;方法2:葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天左右后,保鮮膜揭開1/2,繼續培養5~7天后,保鮮膜全部揭去,并在適當的時間補充葉面肥;方法3:葡萄試管苗假植于泡沫盒中,在大棚中培養7天左右后,泡沫盒的一角揭開保鮮膜一個小口,大小為2~3cm的等腰三角形;繼續培養5~7天后,保鮮膜可揭開1/3左右;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜1/2左右,并給盒中的葡萄試管苗補充適量的葉面肥;繼續培養5~7天后,可揭去保鮮膜,并注意基質水分保持,以防葡萄試管苗失水,繼續培養10天左右,期間補充一次葉面肥;對照:泡沫盒不覆蓋保鮮膜,只注意保濕和適當的補充葉面肥。試驗設3次重復。分別培養35天后,統計試管苗成活情況,結果見表2。從表2可以看出,采用方法3的肥水管理,葡萄試管苗成活率為93.9%,極顯著高于其它兩種方法和對照組,由此可見,葡萄試管苗假植后的肥水管理,以方法3為最佳。

表2:不同肥水管理方法對番茄試管苗成活率的影響

注:表中不同字母表示鄧肯氏新復極差測驗差異顯著性,其中大寫字母為差異極顯著(P<0.01),小寫字母為差異顯著(P<0.05)。

本發明的方法簡單易行,可顯著提高葡萄試管苗移栽成活率,移栽成活率在93%以上;本發明不僅能夠快速獲得大量葡萄無病毒試管苗,且所獲得的葡萄試管苗具有高質量的優點,是具有良好推廣前景的技術。

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