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石斛水提物及其應用.pdf

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石斛 水提物 及其 應用
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摘要
申請專利號:

CN201310046070.6

申請日:

20130205

公開號:

CN103099967A

公開日:

20130515

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/8984,A61P7/04 主分類號: A61K36/8984,A61P7/04
申請人: 云南農業大學
發明人: 田洋,盛軍,白忠彬,郝淑美,高曉余,史崇穎,方崇業
地址: 650201 云南省昆明市盤龍區金黑路落索坡132號云南農業大學
優先權: CN201310046070A
專利代理機構: 昆明今威專利商標代理有限公司 代理人: 楊宏珍
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310046070.6

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種石斛水提物及其應用,屬制藥技術領域。本發明的石斛水提物,經如下方法得到:a.用剪刀將石斛剪碎后按W/V?為1:10~20的比例加入水中燒煮,待石斛在水中煮沸后繼續保持2~4h,然后用紗布過濾棄去殘渣,收集水提液;b.重復a步驟2~4次,合并每次的提取液,提取液經冷凍干燥后得到粉狀石斛水提物。所述石斛是指野生或人工栽培的鮮石斛或干制石斛。所述石斛水提物在制備止血藥物中的應用。本發明的有益效果:1.本發明提供的石斛水提物藥理作用很強,顯著縮短出血時間,揭示其在開發制備止血藥物中的藥用前景。2.本發明為石斛開拓了一個新的應用領域。

權利要求書

1.石斛水提物,其特征在于該石斛水提物經如下方法得到:a.用剪刀將石斛剪碎后按W/V?為1:10~20的比例加入水中燒煮,待石斛在水中煮沸后繼續保持2~4h,然后用紗布過濾棄去殘渣,收集水提液;b.重復a步驟2~4次,合并每次的提取液,提取液經冷凍干燥后得到粉狀石斛水提物。2.權利要求1所述的石斛水提物,其特征在于所述石斛是指野生或人工栽培的鮮石斛或干制石斛。3.權利要求1和2所述的石斛水提物在制備止血藥物中的應用。

說明書

技術領域

本發明涉及一種石斛水提物及其應用,屬制藥技術領域。?

背景技術

血液是維持生命的重要物質,含有各種營養成分,如無機鹽、氧、以及細胞代謝產物、激素、酶和抗體等,具有調節器官活動和防御有害物質的作用。成人的血液約占自身重量的8%,大約每公斤體重有60-80?ml血液。人體發生緩慢少量的出血,可以通過血管收縮,血小板凝集形成血凝塊等作用機制達到止血效果。但人體出血達到總血量的20%以上,就會出現血壓下降,休克等嚴重癥狀,出血超過總血量的40%-50%,就會有生命危險。?

出血對機體的影響除了出血量外,還取決于出血的類型、出血速度和出血部位。破裂性出血若出血過程迅速,在短時間內喪失循環血量20%-25%時,可發生出血性休克。漏出性出血,若出血廣泛時,如肝硬化因門靜脈高壓發生廣泛性胃腸道黏膜出血,亦可導致出血性休克。發生在重要器官的出血,即使出血量不多,亦可引起嚴重的后果,如心臟破裂引起心包內積血,由于心包填塞,可導致急性心功能不全。因此,及時而有效地使用止血藥,可避免血液耗損,防止因失血過多而致循環衰竭,以達挽救生命,保障人民健康的目的,故止血藥的應用,不論在一般治療、創傷或戰傷救護中,都具有重要的意義。?

傳統止血藥物起效較慢,在急性出血時應用效果不理想。立止血是近年來上市的靜脈注射止血藥,是從蛇毒中分離得到的酶類制劑,由于它具有速效,高效、方便且不受血漿凝血酶抑制劑影響等諸多優點,因而在手術止血及各種急性出血治療中得到廣泛應用。但立止血是從蛇毒中分離得到的,原料來源存在一定困難,價格昂貴,而且由?于是大分子物質,還存在過敏原性等問題。因此,目前急需安全、有效的止血天然藥物。?

石斛屬(Dendrobium)為蘭科第一大屬,包括約1500種植物,主要分布于熱帶亞洲和太平洋島嶼。我國約63種石斛屬植物,目前供作藥用的石斛屬植物39種,主要分布在云南、廣西、廣東、貴州等地。石斛始載于《神農本草經》,以“千金草”之譽馳名中外,被國際藥用植物界稱為“藥界大熊貓”,被道家稱為“中華九大仙草”之首。據分析,石斛內含有多種生物堿、石斛多糖以及微量元素和氨基酸等,具有益胃生津,滋陰清熱、明目利嗓等功效。近年來對石斛的藥理研究和應用,除集中在對胃腸道的作用研究以外,國內外學者還發現石斛具有增強機體免疫力,抗腫瘤,治療白內障,降血糖等多種功效。?

但迄今為止,尚未見石斛及其制劑用于止血方面的研究報道。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種石斛水提物及其應用。?

本發明的目的通過下述技術方案予以實現:?

(一)本發明技術方案的基本思路?

1.藥物止血的藥理作用大致可分為:⑴收縮局部血管;⑵作用于凝血過程,縮短凝血時間;⑶改善血管病功能,增加毛細血管對損傷的抵抗力;⑷抑制纖溶酶的活性。根據其藥理的作用機制有多種篩選止血藥物的方法,比如:出血時間的測定,凝血酶源和凝血酶活酶時間的測定,纖維蛋白溶解功能測定,及血小板檢查的方法。但出血時間的測定是觀察受試物對止血作用有無影響而需首要進行的實驗。?

2.出血時間是指血液突破毛細血管,自出血至自然止血所需要的時間。毛細血管一旦被切斷,機體自身會出現應激的止血反應,其出血時間的長短主要與血小板和毛細血管功能有關,具體包括毛細血管收縮,血小板的粘附、聚集及釋放以及血小板血栓的形成,一旦血小?板和毛細血管的功能發生了異常,會導致相應疾病的發生并伴隨出血時間的延長,比如因血管結構或功能異常導致的遺傳性出血性毛細血管擴張癥;血小板數量明顯減少導致原發性或繼發性血小板減少性紫癜;血小板黏附功能異常導致血管性假血友病;血小板聚集功能異常導致血小板無力癥和低纖維蛋白原血癥等等。因此,通過給予實驗動物石斛提取物后觀察其出血時間變化,能夠確認石斛的止血功效,同時石斛對因血小板和毛細血管功能異常而導致的疾病治療具有重要的應用前景。?

(二)為了更好地理解本發明的實質,下面將用石斛的藥理試驗及結果來說明其在制備止血藥物中的應用。?

本發明的石斛水提物,經如下方法得到:?

a.用剪刀將石斛剪碎后按W/V?為1:10~20的比例加入水中燒煮,待石斛在水中煮沸后繼續保持2~4?h,然后用紗布過濾棄去殘渣,收集石斛提取液;?

b.重復a步驟2~4次,合并每次的石斛提取液,提取液經常規冷凍干燥后得到粉狀石斛水提物.?

所述的石斛,是指市場購買的野生或人工栽培的鮮石斛或干制石斛。?

本發明的石斛水提物在制備止血藥物中的應用。?

本發明所述的石斛也能夠通過常規方法制備成常規劑型的制劑。?

2.本發明所述的石斛及其制劑的止血功效?

(1)出血時間的測定原理?

在一定條件下,人為刺破皮膚毛細血管后,從血液自然注出到自然停止所需的時間,稱為出血時間測定。其出血時間的長短主要受血小板的數量和質量、毛細血管結構和功能以及血小板與毛細血管之間相互作用的影響,而受血液凝固因子含量及活性作用影響較小。常采用小鼠斷尾后,出血自然停止的時間作為測試出血時間的指標。?

(2)出血時間的測定方法?

將石斛按一定劑量灌胃給予小鼠后,用特制固定器固定小鼠,以毫米尺測量鼠尾長度并標記之,30~40?min(注射給藥10?min)后,用利剪將小鼠尾尖0.3?cm處橫斷或將小鼠尾遠端1/3處橫斷,待血液自動溢出開始計時,每隔30秒用濾紙吸取血滴1次,直至血液自然停止(濾紙吸時無血)為止,記錄出血時間,所得數據與對照組進行顯著性差異分析。?

(3)出血時間測定的試驗結果?

試驗結果表明,石斛具有良好的止血功效,能夠縮短小鼠尾靜脈出血時間達50%以上,能作為止血藥物或藥物組合成分。?

本發明與現有技術相比,具有以下有益效果:?

1.本發明提供的石斛藥理作用很強,能夠明顯縮短出血時間,揭示其在開發制備止血藥物中的藥用前景。?

2.本發明為石斛開拓了一個新的應用領域。?

附圖說明

圖1為石斛水提物能夠顯著地縮短小鼠尾靜脈出血的時間。?

具體實施方式

通過下面給出的具體實施例和典型應用實施例,進一步詳細說明本發明。?

本發明所用設備為現有的常規設備。?

實施例1:石斛水提物的制備?

本發明的石斛水提物,經如下方法得到:?

a.用剪刀將石斛剪碎后按W/V?為1:10~20的比例加入水中燒煮,待石斛在水中煮沸后繼續保持2~4?h,然后用紗布過濾棄去殘渣,收集石斛提取液;?

b.重復a步驟2~4次,合并每次的石斛提取液,提取液經常規冷凍干燥后得到粉狀石斛水提物.?

所述的石斛,是指市場購買的野生或人工栽培的鮮石斛或干制石斛。?

實施例2:石斛水提物的止血作用?

本實施例所用水提物為實施例1所制備的石斛水提物。?

選取C57BL/6品系小鼠,體重20-25g,雄性。隨機分為三組,分別為對照組(0?g/kg)、石斛水提物低劑量組(0.5?g/kg)、石斛水提物高劑量組(1.0?g/kg),每組9只,給藥后0.5?h測定小鼠尾靜脈的出血時間。給藥方法為對照組灌胃自來水,石斛水提物低、高劑量組分別灌胃不同劑量的石斛水提物溶液。石斛水提物溶液采用實施例1所制備的石斛水提物來配制。實驗時將小鼠放入特制的固定器中,然后以利剪將小鼠尾尖0.3?cm處橫斷,待血液自動溢出開始計時,每隔30秒用濾紙吸取血滴1次,直至血液自然停止(濾紙吸時無血)為止,記錄出血時間。結果見表1和附圖1。?

表1?石斛水提物對小鼠尾靜脈血出血時間的影響?

注:結果用“平均值±標準差”表示;給藥組與對照組比較,經T檢驗統計處理,n.s.為不顯著,*P﹤0.05,**P﹤0.01。?

經統計學分析,灌胃給藥30?min后,對照組、石斛水提物低劑量組和石斛水提物高劑量組的小鼠尾靜脈出血的時間分別為?40.67±5.13?min,13.83±1.59?min,17.33±0.88?min。石斛水提物低劑量組和高劑量組與對照組相比縮短小鼠尾靜脈的出血時間達到50%以上,分別為65.99%和57.39%。石斛水提物低劑量組與對照組比較具有極顯著性差異(P<0.01),石斛水提物高劑量組與對照組比較具有顯著性差異(P<0.05);而低劑量組與高劑量組相比出血時間差異不顯著(P>0.05),這一結果說明:石斛水提物對小鼠具有非常顯著的止血功效。?

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