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烏雞阿膠口服液及其制備方法.pdf

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烏雞 阿膠 口服液 及其 制備 方法
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摘要
申請專利號:

CN201310686368.3

申請日:

20131211

公開號:

CN103751414A

公開日:

20140430

當前法律狀態:

有效性:

失效

法律詳情:
IPC分類號: A61K36/815,A61K9/08,A61P37/04,A61K35/36,A61K35/12 主分類號: A61K36/815,A61K9/08,A61P37/04,A61K35/36,A61K35/12
申請人: 天津凱鏞藥業有限公司
發明人: 楊桂芝
地址: 300457 天津市塘沽區開發區洞庭路118號
優先權: CN201310686368A
專利代理機構: 代理人:
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法律狀態
申請(專利)號:

CN201310686368.3

授權公告號:

法律狀態公告日:

法律狀態類型:

摘要

本發明涉及一種烏雞阿膠口服液及其制備方法,方法的步驟如下:1、將烏雞粉加入質量比為1:5-15,乙醇含量為30%--70%的乙醇水溶液,浸漬提取12-36小時,過濾,浸漬提取1-3次,合并濾液,靜置30~60小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95~0.99的浸膏;2、將枸杞子和大棗,加入3~8質量倍的水煎煮20~60分鐘,過濾,收集濾液,煎煮1~3次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.00~1.10的浸膏;3、將阿膠,加入5~10質量倍的水煎煮烊化,收集濾液,4、將步驟1至3獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.0~1.5倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.0~5.0,攪拌20~40分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;100~120℃滅菌30~60分鐘,得到一種烏雞阿膠口服液。

權利要求書

1.烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是包括如下步驟:(1)按質量百分比稱取:烏雞粉5%~25%,阿膠5%~15%,枸杞子20%~50%,大棗20%~50%;山梨酸鉀0.01%~0.1%;甜菊糖甙0.01%~0.1%;(2)按質量比為1:5~15的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為30%~70%的乙醇水溶液,浸漬提取12~36小時,過濾,收集濾液,提取1~3次,合并濾液,靜置30~60小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95~0.99的浸膏;(3)將所述枸杞子和大棗,加入3~8質量倍的水煎煮20~60分鐘,過濾,收集濾液,煎煮1~3次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.00~1.10的浸膏;(4)將所述阿膠,加入5~10質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.0~1.5倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.0~5.0,攪拌20~40分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱100~120℃滅菌30~60分鐘,得到一種烏雞阿膠口服液。2.根據權利要求1所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述步驟(1)為:按質量百分比稱取:烏雞粉10%~20%,阿膠5%~10%,枸杞子30%~40%,大棗30%~40%;山梨酸鉀0.05%~0.1%;甜菊糖甙0.03%~0.07%。3.根據權利要求1所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述步驟(2)為:按質量比為1:8~11的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%~55%的乙醇水溶液,浸漬提取18~28小時,過濾,收集濾液,提取1~3次,合并濾液,靜置40~50小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95~0.99的浸膏。4.根據權利要求3所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述步驟(2)為:按質量比為1:9~10的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%~50%的乙醇水溶液,浸漬提取24小時,過濾,收集濾液,提取2次,合并濾液,靜置45~48小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.97~0.98的浸膏。5.根據權利要求1所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述步驟(3)為:將所述枸杞子和大棗,加入6質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏。6.根據權利要求1所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述步驟(5)為:將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.3倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.3~4.7,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌30分鐘,即得。7.根據權利要求1~6之一所述的烏雞阿膠口服液的制備方法,其特征是所述烏雞粉的質量標準為:水分:小于等于8.0%,揮發性堿性物質:消耗0.005mol/L的硫酸滴定液不得超過20.0ml;含氮量:大于等于6.0%。8.權利要求1~7之一的方法制備的烏雞阿膠口服液。

說明書

技術領域

本發明涉及一種養血補肝保健食品,特別是涉及一種烏雞阿膠口服液及其制備方法。?

背景技術

“女性以血為本”,血液在身體循環過程中傳遞氧與各種營養成分,直接滋養五臟六腑,幫助調節女性內分泌平衡。女性在驚奇、孕期、產后、術后容易虧耗氣血,如果氣血不足,在內影響月經、睡眠,在外影響肌膚晦暗、發黃,人更顯老。研究發現,每5個女性中就有1個貧血。及時補氣養血,對每個女性都十分重要。?

烏雞:又名烏骨雞,是中國特有的藥用珍禽。現代醫學研究,烏雞內含豐富的黑色素,蛋白質,B族維生素等18種氨基酸和18種微量元素,其中煙酸、維生素E、磷、鐵、鉀、鈉的含量均高于普通雞肉,膽固醇和脂肪含量卻很低。烏雞的血清總蛋白和球蛋白質含量均明顯高于普通雞。烏雞肉中含氨基酸高于普通雞,而且含鐵元素也比普通雞高很多,是營養價值極高的滋補品,被人們稱烏雞是“黑了心的寶貝”;所以,烏雞是補虛勞、養身體的上好佳品。食用烏雞可以提高生理機能、延緩衰老、強筋健骨。對防治骨質疏松、佝僂病、婦女缺鐵性貧血癥等有明顯功效。《本草綱目》認為烏骨雞有補虛勞羸弱,制消渴,益產婦,治婦人崩中帶下及一些虛損諸病的功用。?

大棗:作為中藥應用已有2000多年的歷史,主要用于中氣不足、脾胃虛弱、體倦乏力、食少便糖、血虛萎黃、婦女臟躁等證的治療。? ??近年來藥理研究發現,大棗中含有多種生物活性物質,如大棗多糖、黃酮類、皂苷類、三萜類、生物堿類、環磷酸腺苷(cAMP)、環磷酸鳥苷(cGMP)等,對人體有多種保健治病功效。?

枸杞子:作為中藥,其有補腎益精,養肝明目,補血安神,生津止渴,潤肺止咳的功效。用于治肝腎陰虧,腰膝酸軟,頭暈,目眩,目昏多淚,虛勞咳嗽,消渴,遺精等癥。?

阿膠:阿膠作為馬科動物驢的干燥皮或者鮮皮經煎煮、濃縮制成的固體膠,其性平,味甘,歸肺、肝、腎經,具有補血滋陰、潤燥,止血功效,現代藥理學研究表明,阿膠具有改善貧血、補血、促進凝血,促進造血,增強免疫功能,促進骨愈合,維護機體微生態平衡等作用。? ??上述物質盡管有對人體有很好的作用,但服用不太方便。?

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足,提供一種烏雞阿膠口服液。?

本發明的第二個目的是提供一種烏雞阿膠口服液的制備方法。?

本發明的技術方案概述如下:?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)????按質量百分比稱取:烏雞粉5%~25%,阿膠5%~15%,枸杞子20%~50%,大棗20%~50%;山梨酸鉀0.01%~0.1%;甜菊糖甙0.01%~0.1%;

(2)????按質量比為1:5~15的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為30%~70%的乙醇水溶液,浸漬提取12~36小時,過濾,收集濾液,提取1~3次,合并濾液,靜置30~60小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95~0.99的浸膏;

(3)????將所述枸杞子和大棗,加入3~8質量倍的水煎煮20~60分鐘,過濾,收集濾液,煎煮1~3次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.00~1.10的浸膏;

(4)????將所述阿膠,加入5~10質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)????將步驟(2)和(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.0~1.5倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.0~5.0,攪拌20~40分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱100~120℃滅菌30~60分鐘,得到一種烏雞阿膠口服液。

步驟(1)優選為:按質量百分比稱取:烏雞粉10%~20%,阿膠5%~10%,枸杞子30%~40%,大棗30%~40%;山梨酸鉀0.05%~0.1%;甜菊糖甙0.03%~0.07%。?

步驟(2)優選為:按質量比為1:8~11的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%~55%的乙醇水溶液,浸漬提取18~28小時,過濾,收集濾液,提取1~3次,合并濾液,靜置40~50小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95~0.99的浸膏。?

步驟(2)最好是:按質量比為1:9~10的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%~50%的乙醇水溶液,浸漬提取24小時,過濾,收集濾液,提取2次,合并濾液,靜置45~48小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.97~0.98的浸膏。?

步驟(3)優選為:將所述枸杞子和大棗,加入6質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏。?

步驟(5)優選為:將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.3倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.3~4.7,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌30分鐘,即得。?

烏雞粉的質量標準為:水分:小于等于8.0%,揮發性堿性物質:消耗0.005mol/L的硫酸滴定液不得超過20.0ml;含氮量:大于等于6.0%。?

上述方法制備的一種烏雞阿膠口服液。?

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明。?

下面各實施例所用的烏雞粉的質量標準為:水分:小于等于8.0%,揮發性堿性物質:消耗0.005mol/L的硫酸滴定液不得超過20.0ml;含氮量:大于等于6.0%?。?

烏雞粉采用的是各個廠商生產的,保證滿足烏雞粉的質量標準的烏雞粉即可。?

實施例1?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉10%,阿膠10%,枸杞子40%,大棗39.9%;山梨酸鉀0.07%;甜菊糖甙0.03%;

(2)按質量比為1:9的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%的乙醇水溶液,浸漬提取24小時,過濾,收集濾液,提取2次,合并濾液,靜置48小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.97的浸膏;

(3)????????將枸杞子和大棗,加入6質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入5倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.3倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.3,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌30分鐘,即得。

實施例2?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉16%,阿膠5%,枸杞子38.88%,大棗40%;山梨酸鉀0.05%;甜菊糖甙0.07%;

(2)按質量比為1:10的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為50%的乙醇水溶液,浸漬提取24小時,過濾,收集濾液,提取2次,合并濾液,靜置45小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.98的浸膏;

(3)將枸杞子和大棗,加入6倍質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏;

(4)?將所述阿膠,加入10質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.3倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.5,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌30分鐘,即得。

實施例3?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉11.87%,阿膠8%,枸杞子30%,大棗50%;山梨酸鉀0.1%;甜菊糖甙0.03%;

(2)按質量比為1:11的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為40%的乙醇水溶液,浸漬提取28小時,過濾,收集濾液,提取3次,合并濾液,靜置40小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.96的浸膏;?

(3)將枸杞子和大棗,加入6倍質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入6倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.3倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.7,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌30分鐘,即得。

實施例4?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉5%,阿膠14.9%,枸杞子50%,大棗30%;山梨酸鉀0.05%;甜菊糖甙0.05%;

(2)按質量比為1:8的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為55%的乙醇水溶液,浸漬提取18小時,過濾,收集濾液,靜置50小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.99的浸膏;

(3)將所述枸杞子和大棗,加入3質量倍的水煎煮60分鐘,過濾,收集濾液,濃縮至在60℃時相對密度為1.00的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入7倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.0質量倍的水,加入枸櫞酸調節pH為5.0,攪拌20分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌60分鐘,即得。

實施例5?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉25%,阿膠15%,枸杞子20%,大棗39.89%;山梨酸鉀0.1%;甜菊糖甙0.01%;

(2)按質量比為1:9的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為50%的乙醇水溶液,浸漬提取20小時,過濾,收集濾液,提取2次,合并濾液,靜置45小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95的浸膏;

(3)將枸杞子和大棗,加入4質量倍的水煎煮50分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入8倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.2倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.5,攪拌30分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱110℃滅菌45分鐘,即得。

實施例6?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉25%,阿膠15%,枸杞子39.8%,大棗20%;山梨酸鉀0.1%;甜菊糖甙0.1%;

(2)按質量比為1:5的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為70%的乙醇水溶液,浸漬提取12小時,過濾,收集濾液,提取3次,合并濾液,靜置30小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.99的浸膏;

(3)將桂圓肉,枸杞子和大棗,加入5質量倍的水煎煮40分鐘,過濾,收集濾液,煎煮3次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.10的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入9倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.4倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.2,攪拌40分鐘;過濾,將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱120℃滅菌30分鐘,即得。

實施例7?

烏雞阿膠口服液的制備方法,包括如下步驟:

(1)按質量百分比稱取:烏雞粉15%,桂圓肉8%,枸杞子38.5%,大棗38.44%;山梨酸鉀0.01%;甜菊糖甙0.05%;

(2)按質量比為1:15的比例,將所述烏雞粉加體積濃度為30%的乙醇水溶液,浸漬提取36小時,過濾,收集濾液,靜置60小時,上清液回收乙醇并濃縮至在60℃時相對密度為0.95的浸膏;

(3)將枸杞子和大棗,加入8質量倍的水煎煮20分鐘,過濾,收集濾液,煎煮2次,合并濾液并濃縮至在60℃時相對密度為1.05的浸膏;

(4)將所述阿膠,加入10倍質量倍的水煎煮烊化,收集濾液;

(5)將步驟(2)至(4)獲得的浸膏合并,加入甜菊糖甙和山梨酸鉀,混勻,加入合并后的浸膏質量的1.5倍的水,加入枸櫞酸調節pH為4.0,攪拌30分鐘;將濾液體裝入包裝瓶內;滅菌柜濕熱100℃滅菌60分鐘,即得。

各實施例制備的產品檢測方法:?

【檢查】pH值??應為4.0-5.0

相對密度??應為0.98-1.10

【含量測定】?精密量取本品40ml,照氮測定法(中國藥典2010年版一部附錄?L第一法)測定,即得。

本品每1ml含氮(N)量不得少于0.6mg。?

本發明烏雞阿膠口服液的功效試驗,?

本動物實驗采用實施例1-7制備的的烏雞阿膠口服液。

1材料和方法?

1.1樣品受試物:烏雞阿膠口服液,人擬用劑量為每日20.0ml/60kg。Bw,所用樣品為4倍濃縮液,棕色液體。

1.2試驗動物18—22g雌性SPF級昆明種小鼠160只,合格證號:SCXK(軍)2009-003?0000105?

1.3試驗動物飼養環境:SPF級實驗動物室。

1.4劑量選擇:本實驗設計了低、中、高三各劑量組,分別為0.417ml/kg.Bw、0.833?ml/kg.Bw、1.667?ml/kg.Bw,即相當于人擬用劑量的5倍、10倍、20倍。低、中、高劑量組分別取本樣品受試物4倍濃縮液4.17ml、8.33ml和16.67ml,均價蒸餾水至200ml,充分混勻,按0.2ml/10g.bw灌胃,對照組給予等量的蒸餾水,每日一次,連續30天,末次給受試物后24小時測定各項指標。將試驗動物分為四個大組,每組40只,然后每組40只動物又分為4各小組,分別對照和低、中、高三各劑量組,每組10只,其中一組進行HG50測試、抗體生成細胞檢測、遲發型變態反應(足趾增厚法);2組進行小鼠淋巴腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗、臟/體比值測定;3組進行碳廓清試驗;4組進行小鼠淋巴轉化試驗、NK細胞活性測定試驗。?

1.5試驗方法?

1.5.1臟器/體重比值測定:給受試物30天后,稱取脾臟、胸腺,計算臟/體比。

1.5.2遲發型變態反應(足跖增厚法):給受試物30天,第25天腹腔注射2%SRBC,免疫4天后,測量左后足跖部厚度,同時在測量部位注射20%SRBC?20ul,24小時后再次測量?

1.5.3conA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化試驗(MTT法):給受試物30天,無菌取脾,制成單細胞懸液,,HANK’S液洗3遍,調整細胞濃度為3*108個/ml。將細胞懸液分兩孔加入24孔培養板中,每孔1ml,一孔加75ulConA液(100ug/ml),另一孔為對照,置5%CO2,,37℃孵箱中培養?72小時。培養結束前4小時,每孔吸取上清液0.7ml,加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培養液,同時加入MTT(5mg/ml)50ul/孔,繼續培養4小時,培養結束后,每孔加入1ml酸性異丙醇,吹打均勻,使紫色結晶完全溶解,以570nm波長測定光密度值。

1.5.4半數溶血值(HG50)的測定:給受試物30天,于第25天腹腔注射2%?SRBC,免疫5天后,收集血清,試管內加入300倍稀釋的血清1ml、10%?SRBC0.5ml、補體1ml,37℃水浴20分鐘,冰浴終止反應,離心,取上清1ml,加都氏試劑3ml,10分鐘后540nm比色。?

1.5.5抗體生成細胞檢測:給受試物30天,于第25天腹腔注射2%?SRBC,免疫5天后,脫臼處死,取脾,制成細胞懸液,200目篩網過濾,用hanks液洗3次,每次1000r/min離心10min,將細胞懸浮于5目錄RPMI1640培養液中,并調整細胞濃度為5*106個/ml。將表層培養基加熱溶解,15℃水浴保溫,與等量2倍濃度hanks液混合,分裝小試管,每管0.5ml,加入50ul10%SRBC,20ul皮細胞懸液混勻,倒片,二氧化碳培養箱中培養1小時,加入SA緩沖液稀釋的補體(1:10),繼續培養1小時,計數溶血空斑處。?

1.5.6小鼠碳廓清試驗:給受試物30天后,尾靜脈注射3.5倍稀釋的印度墨汁(每10g體重0.1ml),分別于第2、10分鐘內眥取血20ul,加入到2.98ml0.1%碳酸鈉溶液中,600nm比色。另取肝、脾稱重,計算吞噬指數。?

1.5.7小鼠腹腔巨噬雞紅細胞實驗(半內體法)給受試物30天后,每鼠腹腔注射20%雞紅細胞懸液1ml,間隔30min,頸椎脫臼處死動物,將其仰位固定于鼠板上,正中剪開腹壁皮膚,經腹腔注入生理鹽水2ml,轉動鼠板1min吸出腹腔洗液1ml,平均分滴于2片載玻片上,放入墊有紗布的搪瓷盤內,于37℃孵箱溫育30min,孵畢,生理鹽水漂洗,晾干,以1:1丙酮甲醇溶液固定,4%Giemsa染色10min,計數吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數及被吞噬的巨噬細胞數?

1.5.8?NK細胞活性測定(乳酸脫氫酶測定法):實驗前24h將YAC-1細胞(靶細胞)進行傳代培養,用RPMI1640完全培養液調整細胞濃度為4*105個/ml。無菌取脾,制成單細胞懸液,hanks液洗3遍,調整細胞濃度為4*107個/ml,去靶細胞和效應細胞各100ul(效靶比50:1),加入U型96孔培養板,靶細胞自然釋放孔加靶細胞和培養液各100ul,靶細胞最大釋放孔加靶細胞和1%NP40各100ul,均設3個復孔,于37℃、5%CO2培養箱中培養4h,每孔吸取上清液100ul置瓶底96孔培養板中,同時加入LDH基液100ul,反應3min,每孔加入1mol/l的HCL30ul,在酶標儀492nm測定光密度值。

1.6結果統計:用SPSS11.5?FOR?Window進行統計檢驗。??

2結果

2.1本樣品受試物濃縮液對小鼠體重的影響

表1?受試物對免疫1組小鼠體重的影響(g,均值±標準差)

表2?受試物對免疫2組小鼠體重的影響(g,均值±標準差)

表3?受試物對免疫3組小鼠體重的影響(g,均值±標準差)

表4?受試物對免疫4組小鼠體重的影響(g,均值±標準差)

由表1-4可見,經口給予不同劑量的本樣品受試物濃縮液30天后,各組動物生長活動良好,各劑量組動物增重與對照組比較,差異均無統計學意義p>0.05

2.2本樣品受試物4倍濃縮液對小鼠細胞免疫功能的影響

2.2.1本樣品受試物4被濃縮液對小鼠遲發型變態反應的影響(足趾增厚法)

由表5可見,高劑量組小鼠攻擊前后足趾厚度差值高于對照組,且差異有統計學意義,p<0.05,中低劑量組小鼠攻擊前后足趾厚度差值與對照組相比,差異無統計學意義p>0.05

表5受試物對小鼠遲發型變態反應(足趾增厚法)的影響(均值±標準值)

*與對照組相比較,差異有統計學意義p<0.05

2.3.2本樣品受試物4倍濃縮液對ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化試驗(MTT法)的影響

由表6可見,中、高劑量組對小鼠脾淋巴細胞轉化高于對照組,且差異有統計學意義p<0.05,低劑量組與對照組相比,差異無統計學意義p>0.05

表6?受試物對ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化試驗(MTT法)的影響

?????????????????(均值±標準值)

*與對照組比較,差異有統計學意義p<0.05

2.4本樣品受試物4倍濃縮液對體液免疫的影響

2.4.1本樣品受試物4倍濃縮液對小鼠半數溶血值(HC50)的影響

由表7可見,高劑量組的小鼠半數溶血值(HC50)高于對照組,且差異有統計學意義

p<0.05,中、低劑量組小鼠半數溶血值(HC50)與對照組相比,差異無統計學p>0.05

表7?受試物對小鼠半數溶血值(HC50)的影響(均值±標準值)

*與對照組比較,差異有統計學意義p<0.05

2.4.2本樣品受試物4倍濃縮液對小鼠抗體生成細胞試驗的影響

由表8可見,高劑量租的小鼠抗體生成細胞數高于對照組,且差異具有統計學意義p<0.05,中、低劑量組小鼠抗體生成細胞數與對照組相比,差異無統計學意義p>0.05

表8受試物對小鼠抗體生成細胞的影響(均值±標準值)

*與對照組比較,差異有統計學意義p<0.05

2.5本樣品受試物4倍濃縮液對單核-巨噬細胞功能的影響

2.5.1本樣品受試物4倍濃縮液對小鼠碳廓清試驗的影響

由表10可見,高劑量組的小鼠吞噬指數高于對照組,且差異有統計學意義p<0.05,中,低劑量組的吞噬指數與對照組相比差異無統計學意義(p>0.05)

表9受試物對小鼠碳廓清試驗的影響(均值±標準值)

*與對照組比較,差異有統計學意義p<0.05

2.5.2本樣品受試物4倍濃縮液對小鼠腹腔巨噬雞紅細胞實驗的影響

由表10可見,三各劑量組小鼠的吞噬百分率及吞噬指數與對照組相比,差異均無統計學意義p>0.05

表10?受試物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞試驗的影響(均值±標準值)

2.6本樣品受試物4倍濃縮液NK細胞活性影響

由表11可見,中、高劑量組的NK細胞活性高于對照組相比,且差異有統計學意義p<0.05,低劑量組與對照組相比較,差異均無統計學意義p>0.05

表11受試物小鼠NK細胞活性的影響(乳酸脫氫酶測定法)(均值±標準值)

*與對照組比較,差異有統計學意義p<0.05

3、小結:

本樣品受試物具有增強動物免疫力功能作用。

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本文標題:烏雞阿膠口服液及其制備方法.pdf
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